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目的：本研究通过模拟人抗精子免疫性不孕的发病途径,建立女性生殖道衣原体感染抗精子免疫复合模型,研究沙眼衣原体感染和抗精子免疫状态下全身免疫功能的变化,以及中药清湿化瘀合剂的干预作用,进一步探讨抗精子免疫性不孕的发生机理,以及中医药治疗本病的作用机理。同时通过临床调查,了解沙眼衣原体感染和抗精子抗体阳性不孕患者在不孕人群中的分布情况,及与中医证型分布的关系,探讨沙眼衣原体、抗精子抗体和不孕的关系和相关影响因素,为本研究提供临床佐证。方法和结果：1.临床研究：制定临床观察表,对178例不孕患者进行中医辨证分型,同时检测不孕患者和正常对照组血清抗精子抗体定量和宫颈沙眼衣原体感染情况,了解衣原体感染和抗精子抗体的相关性和影响因素。分析不孕症中医证型与AsAb、Ct感染的关系。结果：①不孕组中AsAb阳性率36.52%,其中原发性不孕组AsAb阳性率31.33%,继发性不孕组AsAb阳性率41.05%,均明显高于对照组(P<0.05)。Ct感染发病率为21.91%,其中原发性不孕者15例,占18.07%,继发性不孕组24例,占25.26%,均明显高于正常对照组(P<0.05)。AsAb阳性患者中衣原体感染率高于AsAb阴性组(P<0.05), Ct与AsAb有显著正相关性。随着流产次数增加,AsAb阳性率和Ct感染率均升高,流产次数≥3次组与流产次数<3次组相比,有显著性差异(P<0.05)。不孕病程3年以上组与病程3年内组相比,Ct的感染率上升(P<0.05),而AsAb阳性率无明显变化。②178例不孕患者中,湿热瘀阻型分布最多,其构成比为34.3%；肾虚血瘀型则占28.09%；肝肾阴虚型最少,占17.42%。不孕患者年龄最多见于25～35岁之间,且此年龄段主要表现为湿热瘀阻证和肾虚血瘀证。湿热瘀阻型组抗精子抗体阳性率和Ct感染率均最高。抗精子抗体与湿热瘀阻型和肾虚血瘀型关系最密切,而Ct感染则形成湿热瘀阻证的可能性最大。2.实验研究：增殖培养E型沙眼衣原体临床株,建立沙眼衣原体生殖道感染大鼠模型。模拟临床病理过程,采用生殖道局部Ct感染和免疫的方法,建立衣原体感染抗精子抗体免疫大鼠模型：随机将SD大鼠分为5组,A组(单纯炎症模型+生理盐水组)、B组(单纯免疫模型+生理盐水组)、C组(炎症免疫模型+清湿化瘀合剂组)、D组(炎症免疫模型+生理盐水组)、E组(空白对照+生理盐水组)。用阴道接种的方法,分别按不同模型接种CtE型原体和/或人精子抗原,并对治疗组予清湿化瘀合剂灌胃治疗3周。实验前后检测血清AsAb、IL-6、IFN-y水平,造模后用培养法检测Ct感染情况,实验后取大鼠脾脏淋巴细胞检测CD4+、CD8+、NK细胞含量。结果：①造模前后体重差A组与D组、C组与D组、D组与E组相比均有显著差异(P<0.01)。说明Ct感染、抗精子免疫和复合模型体重增长均较空白组慢,D组复合模型组最明显。复合模型组大鼠开始时出现烦躁、阴道分泌物增多,外阴红肿等急性炎症表现,后期出现分泌物变稠、大便稀烂、活动纳食减少及松毛等现象。与造模前相比,A组(单纯Ct感染)、B组(单纯免疫)、D组(Ct感染+生殖道主动免疫)抗精子抗体滴度均升高,其中以复合模型组升高最明显。其中B组、D组各自造模前后比较差异有显著意义(P<0.01)。造模后B组、D组与E组(空白对照)相比,差异有显著意义(P<0.01)B组与D组组间相比,差异亦有显著意义(P<0.01)。②衣原体感染组,复合模型组大鼠外周血IL-6与空白对照组相比有所升高,但差异无显著意义(P<0.05)。造模后单纯炎症组、单纯免疫组、及复合模型组血清IFN-γ均升高,复合模型组升高明显,与其他两组有显著性差异(P<0.01),而单纯炎症及单纯免疫组组间无明显差异(P>0.05)。单纯免疫组及复合模型组均出现脾脏NK细胞的含量升高,且复合模型组升高最明显,与正常对照组相比有显著性差异(P<0.05)。单纯Ct感染、单纯免疫模型及Ct感染抗精子免疫复合模型组的CD4+升高及CD4+/CD8+均明显升高,与正常对照组对比,差异有显著性(P<0.05),其中以复合模型组升高最明显。单纯免疫组和复合模型组CD8+含量均下降,其中复合模型组与正常对照组相比有显著性差异(P<0.01)。③血清AsAb定量与外周血清IFN-γ、脾脏CD4+含量、CD4+/CD8+比率、NK细胞含量都有显著的正相关性(P<0.01),而与CD8+细胞含量则呈负相关性。血清IFN-γ水平与脾脏CD4’、CD4+/CD8+、NK细胞均有显著正相关性(P<0.01)。④中药治疗后,治疗组大鼠阴道分泌物减少,外阴红肿情况消失,嗜睡、大便、松毛及活动减少等情况均明显好转。体重增加较复合模型组明显(P<0.01)。与模型组对比,治疗组外周血清AsAb定量明显下降(P<0.01)。与正常组相比,P>0.05。在淋巴细胞方面,与复合模型组相比,治疗组大鼠脾脏NK细胞、CD4+、CD4+/CD8+比率均下降,而CD8+表达升高,差异均有显著意义(P<0.01)。治疗组血清IL-6较复合模型组有所下降,组间比较无显著性差异(P>0.05)。C组大鼠外周血IFN-γ水平明显下降,与正常组差异无显著性(P>0.05),与D组模型组有显著差异(P<0.01)。结论：1.Ct感染及AsAb均可造成女性不孕,Ct感染本身及诱发AsAb产生双重因素可能是女性免疫性不孕的原因之一。湿热瘀阻证和肾肾虚血瘀证是不孕的主要证型,抗精子抗体和衣原体感染均与湿热瘀阻证有显著相关性。2.成功对沙眼衣原体E血清型临床株进行增殖培养,并通过阴道接种的方法建立SD大鼠沙眼衣原体感染模型。基于沙眼衣原体感染的抗精子免疫模型更符合临床实际。3.衣原体感染后的精子主动免疫应答可能诱发抗精子抗体的产生,衣原体感染和抗精子抗体都能引起机体免疫功能的紊乱,且两者有协同作用。衣原体感染抗精子免疫大鼠模型存在Th1/Th2、Th/Ts的平衡失调。4.清湿化瘀合剂能够调节淋巴细胞和细胞因子的含量,改善沙眼衣原体感染抗精子免疫大鼠模型的免疫功能,降低抗精子抗体定量,从而改善生殖功能。