空气暴露对克氏原螯虾肝脏抗氧化、免疫及氨代谢功能指标的影响

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克氏原螯虾(Procambarus clarkii),俗称小龙虾,近年来国内小龙虾产业稳定发展,其已成为我国十分重要的水产经济动物之一。克氏原螯虾等甲壳类水产动物在生产、运输和销售过程中必然经历空气暴露胁迫,为明确空气暴露对克氏原螯虾生理功能造成的影响,将克氏原螯虾连续空气暴露处理0、2、6、12、48和96 h,分别取样并检测其抗氧化、免疫以及氨代谢功能相关生理指标,结果显示如下:克氏原螯虾在空气暴露胁迫下,产生了氧化应激反应。克氏原螯虾肝脏脂质过氧化物LPO与丙二醛MDA含量随着空气暴露时间的延长变化明显,在经历空气暴露后2 h,其LPO含量显著高于对照组(P<0.05);空气暴露胁迫对过氧化还原蛋白Prx6与谷胱甘肽过氧化物酶GSH-Px基因表达的影响同样明显,处理组中Prx6与GSH-Px基因均在0-12 h阶段显著上升,并于12 h达到表达峰值,显著高于其余时间点(P<0.05),之后在48 h处显著降低(P<0.05);另外与对照组相比,处理组GSH-Px与Prx6基因表达量分别从空气暴露2 h和6 h开始持续显著高于对照组(P<0.05)。克氏原螯虾在空气暴露状态下代谢产生过量的自由基,肝脏细胞中脂质成分被过量活性氧自由基ROS氧化,合成Prx6与GSH-Px是机体清除过氧化产物的重要方式。克氏原螯虾肝脏免疫功能指标受到空气暴露影响明显。肝脏碱性磷酸酶AKP与酸性磷酸酶ACP活力随空气暴露时间的变化明显,空气暴露组中AKP活力在0-6 h阶段升高,6 h后逐渐降低,48与96 h AKP活力均显著低于12 h(P<0.05);整个干露处理过程,ACP活力整体呈现逐渐降低的趋势,并在96 h开始显著低于0 h(P<0.05),干露组ACP活力在12与48 h时均显著低于对照组(P<0.05);空气暴露组肝脏多酚氧化酶PPO活性随着时间延长先升高后降低,溶菌酶LSZ活力在12 h时显著低于对照组(P<0.05);总一氧化氮合酶T-NOS活性2 h显著降低(P<0.05),随后在2-48 h阶段先升高后降低,其中12 h时其活性显著高于2、6和48 h(P<0.05);空气暴露对克氏原螯虾肝脏相关免疫基因影响明显,与对照组相比,抗菌肽LSZ基因在2、6、48和96 h时显著高于对照组(P<0.05),抗菌肽ASTA表达水平在48和96 h时显著高于对照组(P<0.05),酚氧化酶原pro PO基因从2 h开始持续显著高于对照组(P<0.05),Toll样受体Toll3基因在6、12、48 h时显著高于对照组(P<0.05),热应激蛋白HSP70在12 h显著表达(P<0.05);处理组中LSZ基因在2 h时显著表达(P<0.05),ASTA基因在12 h时显著表达(P<0.05);Toll样受体Toll3与酚氧化酶原pro PO基因在整个空气暴露前期先升高,pro PO在12 h以后再次显著升高(P<0.05),Toll3的表达逐渐降低,热休克蛋白HSP70表达水平在48 h时显著降低(P<0.05)。干露会对克氏原螯虾谷氨酰胺合成酶GS基因表达产生影响。GS基因表达在6 h和12 h时显著高于对照组(P<0.05);干露组中GS基因表达量在空气暴露0-6 h时逐渐升高,6 h时显著高于0 h与2 h(P<0.05),随后表达水平逐渐降低,48 h时GS表达量显著低于12 h水平(P<0.05),表明机体在空气暴露后,肝脏组织中表达了大量的GS蛋白,及时降低虾体肝脏组织中氨水平。综上所述,克氏原螯虾较大多数甲壳类水产动物而言,其具有较强的抗空气暴露能力,但长时间的空气暴露仍会对克氏原螯虾造成氧化损伤,并对其免疫功能与氨代谢部分功能产生实质性的影响。
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