芒果(Mangifera indica L.)离体形态发生的调控及不定根形成相关基因的克隆

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该研究希望通过对芒果离体形态发生如体细胞胚胎(体胚)发生、不定芽及不定根发生过程的研究,探讨调控这些过程的某些生理生化及分子生物学的机理,并建立芒果离体植株再生体系,为芒果的生物技术育种和种质资源的超低温保存奠定基础.获得的主要结果如下:首次利用芒果未成熟胚的子叶为外植体,成功地建立了通过芒果直接体胚发生的植株再生体系.同时,在该培养基中成熟体胚的下胚轴上可直接诱导二次体胚发生.通过此途径,可望达到芒果离体快繁的目的.利用抑制性扣除杂交(SSH)方法,分别以培养5d的子叶切段远轴切面(非生根切面)作为driver(参照样品),近轴切面(生根切面,此时在某些维管切口部位肉眼可见根原基发生)作为tester(检测样品),构建了芒果子叶不定根形成时的正向扣除文库.经Virtual Northern杂交分析,初步获得6个阳性克隆,这些片段的cDNA所推导的蛋白质分别与膜运载蛋白、FDH(甲酸脱氢酶)、ABC转运蛋白、乙酰辅酶A羧化酶的转录因子同源.从上可知,不同发育阶段的芒果子叶具有不同的离体形态发生能力.以幼胚的子叶为外植体可进行有效的体胚发生,而成熟胚的子叶却能在无激素的培养基中易形成不定根,并具有很强向胚轴极性,因此芒果子叶不但是建立体胚再生植株的有效外植体,而且对离体形态发生的调控机制的研究也是一种理想的材料.
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