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目的:1.探讨HMGB1通过促前列腺间质细胞增殖、迁移作用在良性前列腺增生(BPH)发生过程中起重要作用。2.探讨HMGB1通过影响ERK、STAT信号通路的受体作用途径发挥促前列腺间质细胞增殖的作用。方法:1.购买人前列腺间质细胞并进行细胞培养、传代、冻存,实验分组:control组、HMGB1(50ng/m1)组、HMGB1(100ng/ml)组、HMGB1(200ng/ml)组;CCK8法检测细胞活力;EdU实验检测细胞增殖;流式细胞仪检测细胞周期;Transwell迁移实验检测细胞迁移能力。2.实验分组:control组、5min组、10min组、30min组、60min组,用200ng/ml HMGB1刺激前列腺间质细胞不同时间点后收集细胞,Western-Blot法检测并比较不同时间点p-ERK 1/2、p-STAT3蛋白的表达;实验分组:control组、2h组、4h组、8h组、12h组、24h组,用200ng/ml HMGB1刺激前列腺间质细胞不同时间点后收集细胞,Western-Blot法和免疫组化法检测并比较不同时间点RAGE、TLR4蛋白的表达;实验分组:control组、HMGB1组、HMGB1+FPS-ZM1(RAGE阻断剂10ug/ml)组、HMGB1+TAK-242(TLR4阻断剂1ug/ml)组、FPS-ZM1(10ug/ml)组、TAK-242(1ug/ml)组,用200ng/m1 HMGB1、RAGE阻断剂和TLR4阻断剂刺激前列腺间质细胞5min后收集细胞,Western-Blot法检测并比较各组p-ERK 1/2、p-STAT3蛋白的表达,EdU实验检测细胞增殖,流式细胞仪检测细胞周期。结果:1.给予间质细胞不同浓度HMGB1后,与control组和25ng/ml组比较,50ng/ml、100ng/ml、200ng/ml、400ng/ml/、800ng/ml组细胞的增殖活力明显增加(P<0.05),且200ng/ml、400ng/ml/、800ng/ml组之间无明显差异(P>0.05);与control组比较,50ng/ml、100ng/ml、200ng/ml组细胞EdU的阳性率明显增加(P<0.05),其中100ng/ml、200ng/ml组统计学意义更明显(P<0.01);与control组比较,100ng/ml、200ng/ml组细胞的细胞周期S期细胞比例明显增加(P<0.05),其中200ng/ml组更明显(P<0.01),与EdU实验结果接近;与control组比较,100ng/ml、200ng/ml组细胞的迁移能力也是增加的(P<0.05)。2.给予间质细胞200ng/mlHMGB1 5min、10min、30min、60min干预后,与control组比较,5min、10min组p-ERK 1/2、p-STAT3蛋白表达明显增加(P<0.05),其中5min组表达较明显,且p-STAT3蛋白表达更明显(P<0.01);给予间质细胞200ng/ml HMGB1 2h、4h、8h、12h、24h干预后,与control组比较,4h、8h、12h组RAGE、TLR4蛋白表达明显增加(P<0.05),其中8h组RAGE、TLR4蛋白较其他组表达最明显,且在胞浆胞膜均有表达,其余无明显统计学差异;在给予间质细胞HMGB1的基础上,联合给予RAGE阻断剂后,p-ERK 1/2蛋白表达较单纯HMGB1组下降(P<0.01),p-STAT3蛋白表达较单纯HMGB1组无明显差异(P>0.05),EdU的阳性率较单纯HMGB1组也减少(P<0.05);在给予间质细胞HMGB1的基础上,联合给予TLR4阻断剂后,p-STAT3蛋白表达较单纯HMGB1组下降(P<0.05),p-ERK 1/2蛋白表达较单纯HMGB1组无明显差异(P>0.05),EdU的阳性率较单纯HMGB1组也减少(P<0.05);且联合RAGE阻断剂和联合TLR4阻断剂后,较单纯HMGB1组间质细胞的S期细胞比例也均减少(P<0.01)。结论:1.HMGB1可能通过RAGE、TLR4受体介导的ERK、STAT信号通路促进前列腺间质细胞的增殖。2.HMGB1可能通过促进前列腺间质细胞的增殖来参与BPH的发生发展过程。