猕猴桃胚乳培养与倍性变异的研究

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本实验已以“早金”猕猴桃种子胚乳作为外植体,研究了影响猕猴桃胚乳培养的一系列条件。并以“海沃德”、“早金”猕猴桃胚乳为材料,研究了植物生长调节剂、暗培养、继代时间、秋水仙碱等对胚乳培养过程中染色体倍性的影响。其结果如下:1.以“早金”猕猴桃种子胚乳作为外植体,接种于含蔗糖20g/L,琼脂粉5g/L,pH值5.8的1/2MS培养基上,置于温度为25℃,16/8h光周期的培养室中培养。采用NAA(0,1,2mg/L),2,4-D(0,0.5,1.0 mg/L)和BA(0.5,1,3mg/L)组合讨论不同植物生长调节剂组合对猕猴桃胚乳愈伤组织形成的影响。结果显示:2,4-D对“早金”胚乳愈伤组织形成的诱导作用大于NAA;1mg/L 2,4-D+lmg/L6-BA的植物生长调节剂组合对胚乳愈伤组织的诱导率最大。采用NAA(0,0.1,0.5μmol/L)和BA(O,1,5,10μmol/L)组合讨论不同植物生长调节剂种类及浓度对胚乳愈伤组织中器官形成的影响。结果显示:0.1μmol/L NAA+5μmol/L BA的植物生长调节剂组合对胚乳愈伤组织不定芽的诱导率最大;0.5μmol/L NAA+Iμmol/L BA的植物生长调节剂组合对不定根的诱导率最大。2.以“海沃德”、“早金”猕猴桃胚乳为材料,研究了植物生长调节剂、暗培养、继代时间等对胚乳培养过程中染色体倍性的影响。结果表明:在添加0.2pmol/L NAA+5μmol/L 6-BA的培养基上可以获得更多的3C愈伤组织,高浓度的6-BA可以提高胚乳培养中愈伤组织细胞的加倍率;不经暗培养的与经过7天暗培养愈伤组织相比3C的愈伤组织细胞含量减少,倍性变异更丰富;同一来源的胚乳培养愈伤组织倍性变异率随着时间的增长而提高;与愈伤组织相比胚乳再生植株倍性变异的丰富性下降。3.以“海沃德”、“早金”猕猴桃胚乳为材料,研究了秋水仙碱处理时间、浓度对胚乳培养过程中染色体倍性的影响。结果表明:“海沃德”和“早金”猕猴桃胚乳愈伤组织细胞的染色体加倍率均随着秋水仙碱浓度的升高和处理时间的增加而逐渐提高;用0.05%秋水仙碱处理48h可以在“海沃德”和“早金”胚乳培养中获得更多3C细胞;用0.1%的秋水仙碱处理“海沃德”胚乳愈伤组织24h诱导多倍体再生植株效果最好。
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