【摘 要】
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目的:本实验旨在从龙葵(Solanum nigrum Linne)中提取出具有免疫活性的多糖片段SNLP-1,并在体内外探讨该多糖片段的免疫调节活性及其发挥作用的具体机制。方法:通过水煮醇沉法从龙葵中提取出龙葵粗多糖(crude Solanum nigrum Linne polysaccharides),采用DEAE fast flow离子交换柱层析分级,再经Sephacryl TM S-300
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目的:本实验旨在从龙葵(Solanum nigrum Linne)中提取出具有免疫活性的多糖片段SNLP-1,并在体内外探讨该多糖片段的免疫调节活性及其发挥作用的具体机制。方法:通过水煮醇沉法从龙葵中提取出龙葵粗多糖(crude Solanum nigrum Linne polysaccharides),采用DEAE fast flow离子交换柱层析分级,再经Sephacryl TM S-300 HR凝胶柱进一步分级得到具有免疫活性的均一性多糖片段SNLP-1。高效液相色谱法检测了SNLP-1的分子量大小,并在体外通过Griess法、ELISA的方法分别检测了SNLP-1对巨噬细胞释放NO、分泌细胞因子(TNF-α和IL-6)的影响。建立肺癌小鼠模型,测定了SNLP-1对肺癌小鼠抑瘤率,免疫器官(脾、胸腺)指数的影响。用流式细胞仪、CBA法分析了SNLP-1对小鼠外周血T淋巴细胞亚群CD4~+/CD8~+的比例,血清细胞因子的浓度的影响,并在体内外检测了TLR4-Myd88通路中重要节点的基因、蛋白表达水平。结果:经纯化得到的SNLP-1片段的重均分子量为148.6 kDa。在体外,SNLP-1能活化巨噬细胞,促进NO、TNF-α和IL-6的产生。在肺癌小鼠体内,SNLP-1不仅能减小肺癌小鼠的瘤重,还能提高脾脏和胸腺指数、CD4~+/CD8~+T淋巴细胞比例以及外周血Th1细胞因子(IFN-γ,IL-2,TNF)的水平。基因和蛋白检测结果表明,SNLP-1在体内外均上调了TLR4及其下游的MyD88、TRAF-6等关键节点的表达水平。结论:从龙葵中提取纯化出的均一多糖片段SNLP-1,具有体内外免疫调节活性,且TLR4-MyD88信号通路是其发挥作用的机制之一。
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