【摘 要】
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目的:研究铜绿假单胞菌注射液(PA-MSHA)对胃癌抑制作用并探讨其可能的作用机制。方法:1.选取四种胃癌细胞株(NCI-N87、SGC-7901、BGC823、NUGC4),分别经不同浓度PA-MSHA处理24h,48h,72h后,通过MTT法检测细胞增殖能力变化情况,并筛选出对PA-MSHA敏感的细胞株。2.流式细胞术(FCM)检测不同浓度PA-MSHA处理24h后胃癌细胞的凋亡情况。3.通过
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目的:研究铜绿假单胞菌注射液(PA-MSHA)对胃癌抑制作用并探讨其可能的作用机制。方法:1.选取四种胃癌细胞株(NCI-N87、SGC-7901、BGC823、NUGC4),分别经不同浓度PA-MSHA处理24h,48h,72h后,通过MTT法检测细胞增殖能力变化情况,并筛选出对PA-MSHA敏感的细胞株。2.流式细胞术(FCM)检测不同浓度PA-MSHA处理24h后胃癌细胞的凋亡情况。3.通过细胞划痕实验和侵袭实验检测不同浓度PA-MSHA处理24h后胃癌细胞的迁移和侵袭能力变化。4.通过western blot检测胃癌细胞EGFR和PTEN表达情况,通过siRNA转染敲低EGFR或PTEN表达后,MTT法检测经PA-MSHA处理24h和48h后胃癌细胞增殖能力的变化。5.通过western blot检测经不同浓度PA-MSHA处理24h后相关信号通路蛋白表达变化。结果:1.MTT检测结果显示,与对照组相比,PA-MSHA以剂量和时间依赖方式抑制NCI-N87胃癌细胞的增殖(P<0.05),PA-MSHA对SGC-7901、BGC823、NUGC4三种细胞株无明显抑制作用(P>0.05)。2.流式细胞术结果显示,与对照组相比,PA-MSHA可诱导NCI-N87胃癌细胞凋亡,凋亡率随浓度的增加而提高(P<0.05)。3.细胞迁移和侵袭实验显示,与对照组比较,PA-MSHA可抑制NCI-N87胃癌细胞的侵袭转移能力(P<0.05)。4.与对照组相比,敲低EGFR表达后,PA-MSHA抑制NCI-N87胃癌细胞增殖的能力无明显变化(P>0.05);与对照组相比,敲低PTEN表达后,PA-MSHA抑制NCI-N87胃癌细胞增殖的能力减弱(P<0.05)。5.Western blot结果显示,与对照组比较,PA-MSHA可上调PTEN蛋白表达(P<0.05),在AKT蛋白总量不变的情况下降低p-AKT蛋白表达(P<0.05)。结论:1.PA-MSHA在体外对NCI-N87胃癌细胞具有抑制增殖、促进凋亡、抑制侵袭转移的作用。2.PA-MSHA抑制胃癌作用是通过上调PTEN蛋白表达负性调控AKT信号通路,而非传统的EGFR相关信号通路。
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