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目的:改良生肌玉红膏,继续发挥其良好的治疗作用;为传统生肌中药的可持续发展进行有益的探索。
方法:本实验将传统生肌玉红膏改良为无汞、液状的生肌液,将封闭负压引流装置改造为兼具有给药功能的双管道系统。将50只两月龄雌性SD大鼠按随机区组设计分为模型对照组、麻油组、生肌液组、封闭负压引流组(简称 V.A.C组)、生肌液复合封闭负压引流组(简称复合组),每组10只,每只大鼠各制作一个急性皮肤缺损创面模型。模型组创面不予处理,待其自然愈合,其余各组均给予相应的处理措施。创面愈合过程中,观察创面大体情况,观察创面的愈合率、愈合时间;通过普通HE染色观察创面肉芽组织中毛细血管及成纤维细胞的增殖情况;通过免疫组织化学染色观察创面肉芽组织中巨噬细胞数量及Ⅰ、Ⅲ型胶原的含量及比例。实验结果采用统计软件spss 11.5进行统计分析。
结果:
1.创面大体情况除1只动物不能适应悬吊饲养而衰竭死亡,1只动物麻醉过量死亡外,其余实验动物均存活,造模创面或早或晚愈合,无创面不愈合发生。
2.创面愈合率的观察第3天各组愈合率比较差异无显著性意义(P>0.05)。3天后V.A.C组及复合组愈合速度明显加快,第9天时复合组愈合率超过V.A.c组,组间差异有显著性意义(P<0.05)。
3.创面愈合时间的观察各组创面愈合时间以天计算,复合组及V.A.C组较其它各组愈合时间明显缩短(P<0.05);复合组与V.A.C组愈合时间差异不明显。
4.创面组织形态学观察 V.A.C组及复合组在第3、6天毛细血管数较其它各组均有明显增加,其中第3天V.A.C组略高于复合组(P>0.05);从第6天开始复合组高于V.A.C组(P<0.05),这种趋势一直延续到创面愈合,V.A.C组从第6天后创面毛细血管数呈现明显下降趋势,同期复合组的下降相对比较平缓。第3天各组成纤维细胞数均维持在较低水平,组间无显著性差异;第6天复合组较其它各组均增加明显且高于其它各组(P<0.05)直至创面愈合。
5.创面巨噬细胞(Mφ)数量的观察创面形成后第3、6、9天及创面愈合时生肌液组Mφ的数量均高于V.A.C组及复合组,其中第6、9天的水平较上述两组有显著性差异(P<0.05)。从第6天开始各组Mφ的数量均呈下降趋势,以V.A.C组最明显,而生肌液组与复合组下降幅度相对较小。创面愈合时复合组Mφ的数量均高于 V.A.C组而低于生肌液组。
6.创面Ⅰ、Ⅲ型胶原含量及构成比的观察创面形成后第3天V.A.C组及复合组创面中Ⅰ型胶原的含量及所占的比例均明显高于生肌液组,Ⅲ型胶原含量则以生肌液组为高;第6天V.A.C组、复合组Ⅲ型胶原的含量及所占的比例仍低于生肌液组,统计显示组间差异已没有显著性意义;创面完全愈合后,复合组和生肌液组相比较,Ⅰ、Ⅲ型胶原的比例无明显差别,而与V.A.C组比较差别明显。
7.创面巨噬细胞数量与对应观察指标间的相关性在第3,6天及创面愈合时创面中巨噬细胞数量与创面愈合时胶原构成(Ⅲ/Ⅰ比值)之间均呈现较明显的相关性。
结论:
1.V.A.C在创面愈合的早期能明显促进组织细胞增殖,从而加速创面愈合;其创面愈合时胶原构成不尽理想。
2.生肌液在创面愈合的中后期可以延续创面组织细胞增殖的趋势;维持创面后期巨噬细胞的数量并优化创面胶原构成,从而提高愈合质量。
3.创面愈合时的胶原构成与巨噬细胞的数量具有较明显的相关性。
4.生肌液复合V.A.C在缩短创面愈合时间的同时可以提高创面的愈合质量。两种方法的愈创作用在时序分布、效应对象上具有协同及互补性,可能是其作用的关键机制。