论文部分内容阅读
目的观察异丙肾上腺素（Iso）诱导心肌肥厚中Toll样受体4(TLR4)／核因子-B(NF-B)信号通路及炎症因子的改变，并进一步探讨黄芪甲苷（As IV）对Iso致心肌肥厚的保护作用及其机制。方法体内试验：以Iso5mg﹒kg-1﹒d-1腹腔注射制备大鼠心肌肥厚模型。SD大鼠随机分为6组:对照组、Iso组、 Iso+As IV20,40,80mg﹒kg-1﹒d-1及Iso+Pro40mg﹒kg-1﹒d-1。体外实验：原代培养新生SD大鼠心肌细胞48h，分别加入As IV3,10,30μmol﹒L-1、IκBα磷酸化抑制剂BAY11-70825μmol﹒L-1以及β-受体阻滞剂普萘洛尔（Pro）2μmol﹒L-1作用30min，再加入Iso10μmol﹒L-1继续培养48h。检测各组动物全心质量指数（HMI）、左心质量指数（LVMI）；取左心室组织进行HE染色，测量左心室心肌细胞横径；消化分离法及计算机图像分析系统检测乳鼠心肌细胞体积；考马斯亮蓝法检测乳鼠心肌细胞蛋白含量；RT-PCR法检测心房钠尿肽(ANP)和TLR4的mRNA表达；Western blot检测TLR4、IκBα和p65的蛋白表达；ELISA法检测TNF-α、IL-6的含量。结果体内试验：同对照组相比，Iso组大鼠表现为HMI、LVMI及左心室细胞横径显著增加，ANP、TLR4mRNA、血清中TNF-α和IL-6明显增加，TLR4、p65的蛋白含量增加以及IκBα蛋白含量减少（P<0.01）。与Iso组相比，黄芪甲苷不同剂量组表现为HMI和LVMI降低，左心室细胞横径缩小，ANP、TLR4mRNA表达减少，TLR4、p65的蛋白含量减少以及IκBα蛋白含量增加，血清中TNF-α、IL-6减少（P<0.05），且呈一定的剂量相关性。体外实验：同对照组相比，Iso组心肌细胞体积明显增大，总蛋白含量增加，ANP mRNA、TLR4mRNA和蛋白、p65蛋白表达上调，IκBα蛋白表达下调，细胞外液中TNF-α、IL-6的量显著增加（P<0.01）。黄芪甲苷、BAY11-7082和普萘洛尔均能有效抑制Iso诱导的心肌细胞肥大，使心肌细胞体积减小，总蛋白的量降低，ANP mRNA、TLR4mRNA和蛋白、p65蛋白表达下调，IκBα蛋白表达上调（P<0.05），且上述作用呈一定的剂量依赖性。结论黄芪甲苷对Iso诱导的心肌肥厚有保护作用，其机制可能与抑制TLR4/NF-κB信号通路有关。