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香鳞毛蕨(Dryopteris fragrans(L.)schott)属于多年生落叶草本植物,鳞毛蕨科鳞毛蕨属,主要生长地包括高寒地区的滑石坡、火山周围的岩浆缝隙和森林中的碎石坡等。据记载,早在几百年前的五大连池地区,就有很多少数民族利用香鳞毛蕨治疗多种疾病,尤其对皮肤病疗效独特。引起真菌性皮肤病的主要病原真菌有毛癣菌属、小孢子菌属以及表皮癣菌属三大类。铁锈色小孢子菌(Microsporum ferrugineum)和石膏样小孢子菌(Microsporum gypseum)属于小孢子菌属。毛癣菌属的断发毛癣菌(Trichophyton tonsurans)和红色毛癣菌(Trichophyton rubrum)都易引起脓癣、体癣、头癣、须癣以及强烈的炎症反应的发生和多发性结节等。絮状表皮癣菌(Epidermophyton floccosum)易感染免疫系统健全的宿主的角质层组织,如指甲,毛发,皮肤等。众所周知,癌症困扰着人类的健康和生命,治疗肿瘤的化学合成药物多种多样,但随着肿瘤药物的大量使用,临床上出现了一定的耐药性现象。因此,从天然药用植物中继续分离低毒、高效的新型先导化合物势在必行。本文采用水浸提法,获得香鳞毛蕨的水组分浸膏,利用DM130大孔树脂进行柱层析,洗脱剂依次为20%、40%、65%、95%乙醇,得到相应组分的浸膏,然后进行抗真菌及抗肿瘤的活性跟踪试验。试验结果表明,40%乙醇组分的抗真菌及抗肿瘤效果最好,MIC分别为红色毛癣菌:12.5-25 mg/m L,断发毛癣菌:3.13-6.25mg/m L,絮状表皮癣菌:6.25-12.5 mg/m L,石膏样小孢子菌:12.5-25 mg/m L,四种组分对铁锈色小孢子菌均未显示出明显抑制作用。MFC分别为红色毛癣菌:25-50 mg/m L,断发毛癣菌:12.5-25 mg/m L,絮状表皮癣菌:12.5-25 mg/m L,石膏样小孢子菌:25-50 mg/m L。抗肿瘤活性筛选结果表明,各组分对人肺癌细胞A549、人胃癌细胞SGC-7901和人乳腺癌细胞MCF-7均显示出不同程度的抑制作用,水浸提液的40%乙醇组分的效果最显著,细胞抑制率分别为66.5%、63.6%、70.9%。因此,确定该组分为抗真菌及抗肿瘤最有效组分。利用正相硅胶柱色谱、反相(MCI、ODS)柱色谱、Sephadex LH-20柱色谱、TLC薄层色谱、HPLC高效液相层析等技术对40%乙醇组分进行分离、纯化,得到16个单体化合物,通过多种光谱以及NMR共同检测并结合文献报道确定其结构,其中包括苯丙素类化合物5个、黄酮类化合物3个、香豆素类化合物2个、芳香类化合物2个、木脂素类2个、萜苷类1个、甾醇类1个。抗真菌试验结果表明,香鳞毛蕨苷A、香鳞毛蕨苷K、咖啡酸、槲皮素、对羟基苯甲酸、七叶内酯、香豆酸、β-谷甾醇对五种试验真菌具有不同程度的抑制作用,其中,香鳞毛蕨苷K只对铁锈色小孢子菌具有一定抑制作用,香鳞毛蕨苷A只对红色毛癣菌具有一定的抑制作用。本课题为今后深入研究由以上几种致病真菌引起的皮肤病的治疗提供了新的药用资源。抗肿瘤试验结果显示,香鳞毛蕨苷A、香豆酸和咖啡酸对A549细胞作用48 h与阴性对照组的差异性最显著,抑制率分别为79.3%、76.9%、63.5%,24 h、48 h、72 h三个时间梯度时,IC50值分别为37.98±1.58μmol/L、25.79±1.41μmol/L、19.86±1.30μmol/L和14.92±1.17μmol/L、10.41±1.02μmol/L、8.55±0.93μmol/L和13.65±1.14μmol/L、9.77±0.99μmol/L、8.18±0.91μmol/L;香鳞毛蕨苷K、槲皮素、槲皮素-3-O-β-D-葡萄糖苷对MCF-7细胞作用48 h与阴性对照组的差异性最显著,抑制率分别为78.6%、80.1%、75.7%,24 h、48 h、72 h的IC50值分别为29.32±1.47μmol/L、20.57±1.31μmol/L、13.81±1.14μmol/L和17.06±1.23μmol/L、11.42±1.06μmol/L、9.64±0.98μmol/L和27.71±1.44μmol/L、23.34±1.37μmol/L、16.80±1.23μmol/L;咖啡酸、β-谷甾醇以及槲皮素对SGC-7901细胞作用48h与阴性对照组的差异性最显著,抑制率分别为69.8%、65.8%、72.3%,24 h、48 h、72 h的IC50值分别为32.60±1.51μmol/L、19.37±1.29μmol/L、13.67±1.14μmol/L和30.04±1.48μmol/L、20.46±1.31μmol/L、15.14±1.18μmol/L和15.54±1.19μmol/L、8.96±0.99μmol/L、7.56±0.88μmol/L,均呈现出时间与浓度依赖性。