人干扰素ε是新近克隆的又一新型干扰素家族成员，对其结构和功能目前知之甚少。本研究从人胚胎的肺脏、肝脏、心脏和手四种器官中提取总RNA，利用RT-PCR技术对IFN-ε mRNA在不同组织中的表达分布进行了分析；同时应用酶切连接将获得的IFN-ε目的基因片段插入表达载体pBV220中，转化大肠杆菌DH5α进行表达，发酵扩增培养后纯化，得到纯度高达90％以上的纯品，并进行了IFN-ε抗病毒活性的鉴定。 1、IFN-ε mRNA在人胚胎组织中的分布 利用RNA提取试剂TRIZOL LS Reagent从人胚胎的肺脏、肝脏、心脏和手四种组织中提取总RNA，以看家基因β-actin作为系统内参照，通过RT-PCR技术分析IFN-ε mRNA在不同组织的分布情况，结果表明IFN-ε mRNA在胚胎的肺脏和肝脏中有较高水平的表达，而在心脏和手中几乎没有表达或表达量很低。 2、IFN-ε的表达与纯化 RT-PCR扩增得到的IFN-ε基因经EcoR Ⅰ和Pst Ⅰ双酶切后，插入同样处理的温控型载体质粒pBV220中，转化大肠杆菌DH5α，42℃诱导表达后用12％聚丙烯酰胺凝胶进行SDS-PAGE，得到与预期蛋白分子量大小一致(22KD)的特异条带，且主要以包涵体的形式存在。IFN-ε的制备过程包括发酵和一系列的纯化步骤，IFN-ε基因在启动子P_RP_L控制下发酵表达，培养的细菌经收集、裂解后，将包涵体释放出来，包涵体经含SDS的溶液溶解，DTT还原，最后通过有机溶剂抽提、分子筛层析得到纯度达90%以上的纯品。 3、IFN一的抗病毒活性测定 应用国际公认的细胞病变抑制法，采用滤泡性口膜炎病毒(VSV)-人羊膜传代细胞(W工SH)系统，测定工FN--e的抗病毒活性，其活性为2 .3x 10‘U/ml。