泡沫分离法制备甘薯蛋白的工艺及其特性研究

来源 :福建农林大学 | 被引量 : 4次 | 上传用户:shires2006
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甘薯是我国四大农作物之一,每年产量约在1.2亿t左右,占世界总产量的90%以上。甘薯除当作食物用外,还是制作淀粉的重要原料之一。长期以来,尤其是农户,在甘薯制作淀粉过程中所产生的大量富含蛋白的废水往往都不加处理或稍作处理就直接排放,不仅造成有用资源浪费,而且影响环境。泡沫分离技术(Foam Fractionation)是以气泡为载体来分离表面活性物质的一种新技术,所用的设备不仅构造简单、能耗低、成本小,而且操作与维修方便,同时还可将泡沫分离塔进行控温改造,使其在常温、低温、高温下均可操作。泡沫分离技术目前多用于细胞、蛋白质、酶类物质、皂苷类物质等的分离。本研究采用泡沫分离法回收甘薯淀粉废液中蛋白。1、泡沫分离法制备甘薯蛋白的工艺研究。以蛋白回收率和富集比为考察指标,采用单因素试验方案探讨了进料浓度、pH、气流量、装液量、鼓泡时间、倾斜角度对泡沫分离甘薯淀粉废液中蛋白效果影响。结果表明:在进料浓度4.51mg/mL、pH为4、气流量0.1L/min、鼓泡时间100min、装液量500mL、倾斜角度30°的条件下,甘薯淀粉废液中的蛋白回收率可达84.1%,富集比为1.25。2、泡沫分离法所得甘薯蛋白的纯化。采用超滤装置对泡沫分离法所得的甘薯蛋白进行浓缩后,采用阴离子交换柱DEAE-52以及凝胶色谱柱SephadexG-75对其进行分离和纯化,并用电泳对纯化的泡沫甘薯蛋白进行鉴定。电泳实验结果表明泡沫甘薯蛋白纯度较高,在不添加β-巯基乙醇的条件下,只含有分子量为31kDa、22kDa的部分,添加β-巯基乙醇的条件下,检测出一条分子量为25kDa的条带。3、泡沫分离对甘薯蛋白结构的影响。采用CD、DSC、FT-IR对纯的泡沫甘薯蛋白进行二级结构鉴定,结果表明与等电点法生产的纯甘薯蛋白相比,泡沫分离可使甘薯蛋白的二级结构发生变化。α-螺旋和β-折叠含量有升高;而β-转角含量降低,无规则卷曲含量降低。4、超高压处理对泡沫甘薯蛋白水解产物抗氧化活性的影响。最后探讨了超高压对于泡沫甘薯蛋白酶解肽的抗氧化性影响,分别采用Pepsin、Alcalase、AS1.398对100-600Mpa超高压处理中和常压下的泡沫蛋白进行水解,并对不同水解产物的水解度、·OH自由基清除能力、Fe2+螯合力、DPPH清除率之间的相关性进行探讨。结果表明:相对于常压,300和400Mpa可达到最高水解度,相同条件下,As1.398中性蛋白酶水解泡沫蛋白的水解度最高,最大值可达34%;Alcalase碱性蛋白酶最大水解度为29%;pepsin胃蛋白酶最大水解度可达6.2%;pepsin胃蛋白酶水解产物的.OH自由基清除率最大,可达83.5%;三种酶水解产物的DPPH清除率相差不大,但属AS1.398中性蛋白酶水解产物的DPPH清除率最大,可达85.77%;Alcalase水解产物的Fe2+螯合力最大,可达34.37%。
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