DAPI标记的脂肪干细胞修复兔退变椎间盘及Ⅱ型胶原、蛋白多糖含量变化的研究

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目的:研究DAPI标记的脂肪干细胞修复兔退变椎间盘及Ⅱ型胶原、蛋白多糖含量变化。方法:采用动物实验,25只3月龄大小雌性新西兰大白兔,随机分为两组,实验组20只,对照组5只,均行椎间盘退变模型制备,同时培养脂肪干细胞,于造模2周后,实验组退变椎间盘内注射DAPI标记的脂肪干细胞,对照组注射等量生理盐水,分别于注射后1周、2周、4周、8周处死动物取材,平均每个时间点处死5只实验组兔子及1只对照组兔子。于ADSCs移植前、移植后8周行X、MRI扫描,观察椎间盘变化情况;标本固定后行HE染色、DAPI染色、电镜扫描,酶联免疫吸附实验(ELSIA)检测Ⅱ型胶原、蛋白多糖(ELSIA)含量,评估ADSCs修复兔退变椎间盘情况及脂肪干细胞、Ⅱ型胶原、蛋白多糖变化。结果:兔子造模25只,死亡6只,补充完整后,再次造模及注射ADSCs及生理盐水,兔子无死亡。第8周X线及MRI结果示:实验组椎间盘高度高于对照组,差异有统计学意义,ELSIA检测结果示:Ⅱ型胶原、蛋白多糖含量实验组明显高于对照组,P<0.05,差异有统计学意义;电镜、HE染色、DAPI染色均显示:实验组髓核内细胞明显多于对照组。结论:ADSCs移植后能增加退变椎间盘中Ⅱ型胶原、蛋白多糖及水分的含量,且能增加椎间隙高度,DAPI标记能清晰显示植入椎间盘后脂肪干细胞。
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