目的:1.研究不同生长年限的霍山石斛与其主要伪品——河南石斛多糖及醇溶出物的含量,探索霍山石斛与河南石斛之间的差异及最佳采收年限。2.研究不同光照条件下组培霍山石斛多糖及多酚含量的差异,探究组培霍山石斛的最佳光照条件。3.采用TMS柱前衍生化GC-MS分析研究不同种源的霍山石斛多糖的单糖组成,同时对其它几种石斛多糖的单糖组成进行对比研究,从多糖的单糖组成角度揭示不同种源霍山石斛药效物质基础的相似性、为霍山石斛的鉴定提供依据。4.研究霍山石斛多糖的一级空间结构,为进一步的构效关系研究提供基础数据。方法:1.通过95%醇提后,再经水提醇沉、蒽酮-硫酸显色、烘干称重研究不同年限组培霍山石斛、野生霍山石斛及其主要混伪品河南石斛的多糖及醇溶出物的含量,判断两者之间的差异及最佳采收期。2.通过在人工气候室中,将两组同种组培霍山石斛给以LED、红蓝光两种不同光照,对比两种光照处理的霍山石斛多糖及多酚含量的差异。3.将霍山石斛及几种其他石斛精制多糖经盐酸甲醇酸解后,经TMS衍生化、GC-MS检测几种石斛多糖的单糖组成,判断几种石斛多糖的单糖组成之间的差异。4.将提取得到的霍山石斛多糖经聚酰胺柱脱色、DEAE Bestarose FF及Sephacryl G-200分离得到的单一组分多糖通过高效凝胶色谱柱、GC-MS、FTIR及NMR分析其纯度、单糖组成、糖苷键链接方式及官能团特性判断其一级空间结构。结果:1.组培及野生霍山石斛中的多糖及醇溶出物含量高于河南石斛,不同生长年限3种石斛的多糖及醇溶出物的含量之间存在明显差异,综合考虑,2年生的组培及野生霍山石斛、河南石斛的多糖及醇溶出物含量最高。2.在本实验条件下,两组光照处理下的组培霍山石斛,其LED光照处理的3.LED光处理的霍山石斛的多糖及多酚总含量高于红蓝光处理的霍山石斛,且两组不同光照处理的组培霍山石斛,其茎中多糖及多酚的含量明显高于根、叶中的含量。4.霍山石斛与其它几种石斛多糖的单糖组成含量之间具有明显差异,经GC-MS检测发现组培霍山石斛多糖中甘露糖和葡萄糖含量分别为62.0±1.2和27.0±11.1%,大约是野生霍山石斛和野生环草石斛多糖中甘露糖和葡萄糖含量的2至3倍,野生霍山石斛多糖中半乳糖的含量为25.8±11.3%远高于组培霍山石斛多糖中半乳糖的含量(2.2±10.9%)。其他几种石斛多糖的单糖组成含量之间也具有显著差异。5.经分离纯化得到一种分子量为8.0×105 Da的酸性单一组分多糖TC-DHPA4,由鼠李糖、阿拉伯糖、甘露糖、葡萄糖、半乳糖和葡萄糖醛酸按1.28:1:1.67:4.47:10.43:1.42摩尔比组成。主链由(1→6)-linked glucose,(1→4)-linked glucuronic acid,(1→4,6)-linked glucose,(1→6)-linked galactose,(1→3,6)-linked galactose组成。结论:组培霍山石斛和野生霍山石斛中多糖及醇溶出物的总量均高于河南石斛,且组培霍山石斛和野生霍山石斛多糖的单糖组成含量同其他几种石斛相比较具有显著差异。LED光照处理更有利于组培霍山石斛多糖及多酚的积累。此外,可能由于生长环境因素,组培和野生霍山石斛多糖的单糖组成含量之间也存在差异性。从化学组成含量考虑,采用霍山石斛茎入药更加合理。对分离得到的霍山石斛酸性单一组分多糖进行结构鉴定,为霍山石斛的构效关系研究提供理论依据。