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目的：(1)观察WD患者心电图、心脏彩色多普勒超声心动图、脑钠尿肽(BNP)、同型半胱氨酸(HCY)、血乳酸脱氢酶(LDH)、肌酸激酶(CK)、肌酸激酶同工酶(CK-MB)、心肌肌钙蛋白I、肌红蛋白(MYO)、超敏C反应蛋白(hs-CRP)、心型脂肪酸结合蛋白(hFABP)、缺血修饰白蛋白(IMA),探讨WD患者是否存在心脏损害；(2)通过临床病例观察Wilson病是否存在心脏损害,对Wilson病进行不同的治疗方案,观察其对心脏损害指标及临床疗效的影响,证实肝豆灵是否具有改善心脏损害指标的作用；(3)使用肝豆灵和青霉胺对铜负荷模型大鼠进行干预,观察心肌组织铜含量及心脏损害指标及组织病理形态学的变化,为临床铜离子对心脏的损害提供动物实验依据。方法：(1)临床收集符合实验纳入标准的60例WD患者,将其随机分成治疗组30例和对照组30例,并随机选取体检人员20例作为健康组。治疗组予肝豆灵+DMPS,对照组予DMPS,6天为一个疗程,共干预4个疗程(每疗程间歇2天)。观察2组患者心电图、彩色多普勒超声心动图、BNP、HCY、LDH、CK、CK-MB、cTn-I、 MYO、hs-CRP、hFABP、IMA及临床疗效、中医证候积分、安全性等指标,并对其指标及相关性进行分析。(2)采用铜负荷模型大鼠,造模8周,给药6周后留取心脏组织标本及血清。采用酶联免疫分析试剂盒测得铜负荷大鼠模型血清BNP、HCY、LDH、CK, CK-MB、 cTn-I、cTn-T、MYO、hs-CRP、hFABP、IMA,测得心脏组织铜含量,采用H-E染色及电镜下观察心脏组织的病理变化,使用Western blot检测WD模型大鼠心脏组织HO-1蛋白表达。(3)所有数据统计分析采用SPSS17.0,以均数±标准差(x±s)表示,组间比较采用随机区组设计资料的方差分析,组内比较采用t检验,等级资料采用Ridit分析,计数资料采用卡方检验等。当统计结果P<0.01为有极显著差异,P<0.05为有显著差异,P>0.05无统计学意义。柱状图绘制均采用GraphPad Prism5软件。结果：(1)WD患者心脏损害指标变化1)心电图：与健康组比较WD患者的心电图异常率明显高于健康组,且差异有统计学意义(P<0.01)2)彩色多普勒超声心动图：与健康组比较WD组患者左房内径、右室内径的数值均高于健康组,但差异均无统计学意义(P>0.05)；射血分数的值低于健康组,差异无统计学意义(P>0.05)；左室内径的数值高于健康组,且差异有统计学意义(P<0.05)3)血清学指标：与健康组比较WD组患者CK、LDH、IMA、cTn-1、hFABP、 hs-CRP、HCY值均高于健康组,且之间差异均有统计学意义(P<0.01),CK-MB、 BNP、MYO值高于健康组但差异无统计学意义(P>0.05)。与健康组比较,WD患者血清CER、TYHM、血清Cu含量明显减低,且差异有统计学意义(P<0.01)。(2)临床总疗效评估经过4个疗程后肝豆灵+DMPS联合使用临床总疗效明显优于DMPS组。与同组治疗前比较,治疗后治疗组中医证候积分值明显降低(P<0.01)；对照组也有下降,差异有统计学意义(P<0.05)；治疗后2组比较,治疗组中医证候积分值改善明显优于对照组,差异有统计学意义(P<0.01)。(3)临床疗效性指标评估1)心电图：与同组治疗前比较,治疗组的疗后心电图异常率下降,且差异有统计学意义(P<0.05)。对照组心电图变化差异无统计学意义(P>0.05)。2)彩色多普勒超心动图：与同组治疗前比较,治疗组治疗后左房内径、左室内径、右室内径的差异无统计学意义(P>0.05)；射血分数明显升高,且差异有统计学意义(P<0.01)。对照组治疗后各项指标差异无统计学意义(P>>0.05)。2组治疗后组间比较,治疗组有右室内径、射血分数的改善情况优于与对照组,且差异有统计学意义。3)心脏损害相关的血清学指标：与同组治疗前比较,治疗组CK、CK-MB、LDH、 BNP、HCY、hs-CRP、IMA、 cTn-I、hFABP、MYO及对照组LDH治疗后其数值均有所下降,且差异有统计学意义(P<0.01)；对照组CK、BNP、HCY、hs-CRP、 IMA, cTn-I、hFABP、MYO、IMA治疗后也有所下降,但差异无统计学学意义(P>0.05)；对照组CK-MB经治疗后略有上升但差异无统计学学意义(P>0.05)。2组治疗后组间比较,治疗组CK、CK-MB、LDH、HCY、hs-CRP、IMA、cTn-I、hFABP的改善情况均优于与对照组,且差异有统计学意义(P<0.01或P<0.05)；BNP、MYO虽有改善但其差异无统计学意义(P>0.05)。4)铜蓝蛋白、铜氧化酶活力、血清铜、24h尿铜：与同组治疗前组内比较,2组CER、TYHM及血清铜均无明显差异(P>0.05)；治疗后组间比较差异无统计学意义(P>0.05)。与同组治疗前比较,2组的24h尿铜量均升高,差异有统计学意义(P<0.01)；治疗后组间比较,治疗组24h排铜量升高优于对照组,差异有统计学意义(P<0.01)。(4)安全性指标1)血常规：同组治疗前后比较,治疗组RBC、WBC、PLT值稍有降低,差异无统计学意义(P>0.05)；对照组的RBC、WBC、PLT值明显降低,且差异有统计学意义(P<0.01)。2组治疗后比较,治疗组WBC、PLT均较对照组升高,且差异有统计学意义(P<0.05); RBC变化无统计学意义(P>0.05)。2)肝肾功能：与同组治疗前比较,治疗后治疗组、对照组ALT、AST有所下降,但治疗组下降更明显,且差异有统计学意义(P<0.05)；2组治疗后BUN、Scr差异均无统计学意义(P>0.05)。2组治疗后组间比较,治疗组ALT、AST的改善明显优于对照组,且差异有统计学意义(P<0.01)。3)不良反应：治疗组不良反应发生率6.7%、对照组30.00%,差异有统计学意义(P<0.05)。(5)动物实验研究结果1)大鼠心肌组织铜含量：与空白组比较,模型组大鼠心肌组织铜含量明显升高,且有统计学意义(P<0.01)；与模型组比较,青霉胺组和肝豆灵组心肌铜含量下降且有统计学意义(P<0.01)；与青霉胺组比较,肝豆灵组心肌铜含量稍高,差异有统计学意义(P<0.05)。2)大鼠血清学指标：与空白组比较WD模型组大鼠血清IMA、hFABP、LDH、 CK、CK-MB、cTn-I、cTn-T、MYO、BNP、hs-CRP、HCY值均显著升高,且差异有统计学意义(P<0.01)；与模型组比较,青霉胺组、肝豆灵组IMA、hFABP、 LDH、CK、CK-MB、cTn-I、cTn-T、MYO、BNP、hs-CRP、HCY值均显著降低,且差异有统计学意义(P<0.01)；与青霉胺组比较肝豆灵组大鼠血清IMA、hFABP、 LDH、cTn-I、cTn-T值显著降低,且差异有统计学意义(P<0.01)；与青霉胺组比较肝豆灵组大鼠血清MYO、BNP、hs-CRP、HCY值降低,且差异有统计学意义(P<0.05)；与青霉胺组比较肝豆灵组大鼠血清CK、CK-MB值的差异无统计学意义(P>0.05)。3)大鼠心脏组织病理学变化：本研究结果观察到肉眼下各组大鼠心脏组织无明显差异,电镜下可见心肌组织肌丝断裂,线粒体空泡化等改变,以上改变模型组最明显,青霉胺组及肝豆灵组均有改善且以肝豆灵组改善较明显。H-E染色光镜下可见模型组大鼠心肌细胞水肿、局部横纹模糊甚至消失,以上改变模型组较明显,青霉胺组和肝豆灵组均稍有改善,以肝豆灵组改善稍明显。4) Western blot检测结果：实验研究表明模型组大鼠心肌HO-1的表达明显低于空白组,说明造模8周后模型组大鼠的心肌存在一定损害,而肝豆灵和青霉胺干预的2组大鼠心肌HO-1的表达均有所恢复,以肝豆灵组相对明显。结论：(1)WD患者存在一定程度的心脏损害；(2)肝豆灵能较好改善痰瘀互结型WD患者的临床症状,具有一定保护心脏的作用,改善WD患者心电情况,且能增加24h尿排铜量；(3)铜负荷模型大鼠模型可用于实验观察铜沉积导致组织器官损害的发病机制及药物疗效的观察；(4)实验发现铜负荷模型大鼠心肌组织的铜沉积,并引起肌丝、线粒体等损害,心脏损害相关的血清学指标的变化等；(5)肝豆灵能够恢复大鼠HO-1的表达,且对铜负荷模型大鼠心脏组织损伤具有一定的保护作用。