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目的:研究新型Ⅱa类HDAC抑制剂CC1007能否增强人卵巢癌细胞株HO8910、SKOV3、SKOV3/DDP对顺铂的敏感性及产生逆转耐药的作用,并初步探讨CC1007靶向HDAC4复合物调节STAT1活性逆转卵巢癌顺铂耐药的可能机制。方法:1.采用体外诱导的方式,取对数生长期SKOV3细胞在含顺铂的培养液中培养,逐渐增加药物浓度,诱导出耐药细胞株SKOV3/DDP。2.MTT比色法检测不同药物组干预HO8910、SKOV3、SKOV3/DDP细胞24h、48h、72h后细胞生长抑制率,实验分组设立空白组、对照组、单用顺铂组、单用CC1007组、顺铂联合CC1007组,计算半数抑制浓度(IC50),并绘制浓度-抑制率图形及时问-抑制率图形。实验重复3次。3.蛋白质印迹法分析不同药物组处理前后HDAC4、STAT1、pSTAT1的表达情况。实验重复3次。4.实验所得数据应用SPSS17.0统计学软件进行统计学分析,P<0.05表示有统计学意义,统计方法使用单因素方差分析、直线回归分析及t检验。结果:1.对SKOV3细胞经过顺铂诱导,获得在顺铂浓度为2.0ug/ml培养基中良好生长的SKOV3/DDP细胞株,耐药指数RI=耐药细胞IC50/亲本细胞IC50=10.251(ug/ml)/3.081(ug/ml)=3.33。2.MTT比色法检测:(1).单用CC1007组:H08910细胞48h半数抑制浓度IC50为10.831±1.035μM,SKOV3细胞48h半数抑制浓度IC50为60.462±1.781μM, SKOV3/DDP细胞48h半数抑制浓度IC50为28.355土1.453μM。(2).单用顺铂组:H08910细胞24h半数抑制浓度IC50为5.492ug/ml,48h IC50为1.207ug/ml,72h IC50为0.762ug/ml; SKOV3细胞24h半数抑制浓度IC50为5.161ug/ml,48h IC50为3.081ug/ml,72h IC50为2.570ug/ml; SKOV3/DDP细胞24h半数抑制浓度IC50为32.817ug/ml,48hIC50为10.251ug/ml,72h IC50为6.470ug/ml。顺铂对三种卵巢癌细胞的抑制率呈明显浓度和时间依赖关系,三种卵巢癌细胞对顺铂敏感程度依次为:HO8910>SKOV3>SKOV3/DDP细胞。(3).顺铂联合CC1007组:5μM CC1007联合顺铂对H08910细胞48h顺铂半数抑制浓度IC50为0.476ug/ml;10μM CC1007联合顺铂对SKOV3细胞48h顺铂IC50为1.81ug/ml;10μM CC1007联合顺铂对SKOV3/DDP细胞48h顺铂IC50为3.572ug/ml。顺铂联合CC1007与单用顺铂两种用药方式比较差异有统计学意义(P<0.05),低剂量CC1007对三种卵巢癌细胞HO8910、SKOV3、SKOV3/DDP的顺铂增敏作用显著。3.蛋白质印迹法分析:(1).STAT1基础表达量与三种细胞顺铂的IC50呈正相关;·(2).HDAC4表达水平与卵巢癌细胞顺铂耐药性呈正相关,耐药株SKOV3/DDP较其亲本株SKOV3的HDAC4表达量有所增加;(3).三种卵巢癌细胞中p-STAT1基础表达量均不高,顺铂作用下,HDAC4低表达的H08910中p-STAT1表达量无明显改变,HDAC4高表达的SKOV3/DDP中p-STAT1表达量明显增加,CC1007抑制了顺铂诱导的p-STAT1表达增加,在HDAC4高表达的SKOV3/DDP中抑制作用最显著。结论:1.低剂量CC1007能明显增强HO8910、SKOV3对顺铂的敏感性,且一定程度上逆转了耐药细胞株SKOV3/DDP耐药性。2. HDAC4表达水平与卵巢癌细胞的顺铂敏感性呈负相关,卵巢癌的顺铂耐药性与HDAC4高表达从而激活STAT1(p-STAT1表达增加)相关。3.CC1007能靶向HDAC4复合物,抑制HDAC4复合物介导的STAT1激活,发挥逆转卵巢癌顺铂耐药的作用。