前列腺癌淋巴道转移相关基因的探索

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本课题通过利用人前列腺癌细胞裸小鼠体内转移模型,对原发灶和转移灶内肿瘤细胞在生物学特征及基因表达水平上的差异进行了比较分析。首先,利用异种移植法建立人前列腺癌动物模型,分别采用皮下接种和原位(前列腺内)接种两种方法将同样数目的PC-3M细胞(激素非依赖型前列腺癌细胞)移植到裸小鼠体内,一段时间后取接种部位肿瘤组织及局部淋巴结制成病理切片行组织学检查。结果显示,两种方法建立的前列腺癌模型肿瘤发生率均达到10/10(100%);但在淋巴道转移率上有重大差异,采用皮下接种法未发生任何淋巴道转移,而原位接种法能产生7/10(70%)的转移率。从原位接种PC-3M细胞且证实发生淋巴道转移的裸小鼠体内分别取出癌变的前列腺组织和发生转移的淋巴结,分别分离出肿瘤细胞并进行常规培养,使用抗人细胞角蛋白单克隆抗体免疫细胞化学染色方法证实其为人源性的上皮细胞,分别命名为PC-3M-PRO和PC-3M-LN。进行了体外侵袭试验和异质性粘附试验,结果证实转移淋巴结来源的肿瘤细胞比原发灶内的肿瘤细胞具有较强的基质胶侵袭能力和异质性粘附能力。使用基因芯片技术检测了这两种细胞在96种人类肿瘤转移相关基因的表达水平,结果发现有10种基因在转移淋巴结来源的PC-3M-LN细胞中表达水平明显高于原发灶的PC-3M-PRO细胞。使用半定量RT-PCR技术对其中四种差异性表达的基因在两种细胞的表达进行了表达分析,结果与基因芯片结果基本一致。
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