一.关于两个不同人工雌核发育草鱼群体基因组DNA的RAPD分析: 采用随机扩增多态性DNA(RAPD)技术对连续两代人工诱导雌核发育草鱼群体和一代人工诱导雌核发育草鱼群体的群体内的遗传相似度、遗传距离以及群体多样性进行了分析,并用一个随机取样的普通草鱼群体作比较。其中的一个雌核发育草鱼群体是经历了连续两代人工雌核发育的极体-有丝-雌核发育草鱼群体。另一个雌核发育草鱼群体是通过一次人工雌核发育所获得的有丝-雌核发育草鱼群体。普通草鱼群体随机取自长沙的农贸市场。 用26个多态性引物在三个群体中共检测到了291个扩增位点;在三个群体中检测到的位点数分别为265、272和282。其中多态性位点数分别为15、19和81。遗传学统计分析结果表明:三个群体的多态位点比例分别为5.66%、6.99%、28.72%;香农表型多样性指数分别为0.1702、0.3169和0.8450;按照Nei指数统计的三个群体的遗传相似度分别为0.9851、0.9820、0.9114。这些结果表明:两个雌核发育草鱼群体的遗传多样性远低于普通草鱼群体,而其群体的基因组DNA同质性远高于普通草鱼。而在两个雌核发育草鱼群体中,两代雌核发育群体的遗传多样性要低于一代雌核发育群体的遗传多样性;而群体的遗传纯合度则前者高于后者。 二、金鱼vsx1基因基因组结构分析: vsx1基因编码的蛋白具有一个paired-like的同源异型域和CVC域,是与眼睛早期发育相关的重要基因,对视网膜前体细胞的增殖,杆状和椎体双极细胞的特化、分化以及分化状态的维持具有重要作要。本研究以金鱼为材料,分离和克隆了金鱼的vsx1基因,分析了其基因的结构,确定了vsx1基因的碱基序列及其5′端部分序列,为进一步深入研究vsx1基因的功能创造了条件。 根据已知的vsx1基因的5′端部分序列,设计三个嵌套式的基因特异引物(GSP),与不同的任意一个随机引物组合作为TAIL-PCR反应的引物,提取金鱼尾鳍的基因组DNA用作聚合酶链式反应(PCR)