丹参茎叶资源化学研究与药材质量标准的建立

来源 :南京中医药大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:squllwu20090907
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本论文共分四章内容。第一章分别从我国鼠尾草属药用植物资源化学和丹参资源生产过程废弃物的资源化利用两方面综述了丹参的研究进展。丹参中富含丹酚酸类、丹参酮类、多糖类等资源性化学物质,具有抗菌消炎、抗氧化、抗肿瘤、抗血小板聚集、抗血栓等药理作用,以丹参为原料的医药保健产品广泛应用于心脑血管领域。本章通过对丹参资源分布、利用现状及其产业化过程废弃物的产生、可利用物质、利用途径及其产业化等方面进行分析,以期为丹参药用植物资源的高效综合利用,以及丹参生产与加工过程固体废弃物的资源化利用提供参考和指导。第二章主要开展丹参地上部分资源性化学成分积累动态研究及不同类型资源性化学成分评价研究。通过液质联用技术、苯酚-浓硫酸法测定丹参地上部分丹酚酸类、核苷类和氨基酸类以及多糖类等资源性化学成分,明确丹参地上部分资源利用价值,探讨其资源化利用策略,从而为丹参非药用部位的资源化利用提供科学依据。(1)运用UPLC-TQ/MS联用技术对丹参地上茎叶、花序中7种丹酚酸类化学成分进行分析与评价,并探讨其在丹参植物生长过程中的动态积累规律,以期挖掘丹参地上部分的资源化利用价值与产业化开发前景。结果表明,丹参茎叶中含有丰富的水溶性丹酚酸类化学成分,但未检测到脂溶性的丹参酮类成分;不同生长期丹参茎叶中酚酸类化学成分的量差异较大,除丹酚酸A外,各酚酸类成分量均在7-8月积累量达到最高值,以后逐渐降低。丹参花序中的丹参酚酸类成分总量在花盛期达到峰值,其在达到花盛期前动态变化趋势不明显,但当花冠进入凋萎期时,丹酚酸类成分量急剧下降。说明中药丹参传统非药用部位茎叶及花序中含有丰富的水溶性丹酚酸类资源性化学成分,尤其是迷迭香酸和丹酚酸B量较高,生长茂盛期其酚酸类成分的总量明显高于药材丹参根及根茎中的含量。提示丹参茎叶、花序可作为获取丹酚酸类化学物质的重要原料资源。(2)丹参不同部位中多糖含量的含量:根>花序>茎叶,不同产地的丹参茎叶中多糖含量存在差异,其中山东和江苏的含量相对较高;不同花期的丹参花序中,多糖含量在初花期和盛花期含量差异不显著,花序凋谢时多糖含量开始明显降低。(3)丹参根、茎叶和花序中均含有丰富的核苷类及氨基酸类成分,其中含量均较高的核苷类及氨基酸类主要有:尿苷、肌苷、腺苷-5’-单磷酸、胞苷-5’-单磷酸、谷氨酰胺、天冬酰胺。第三章建立了丹参茎叶药材的指纹图谱和质量标准,并对丹参茎叶药材的干燥加工方法进行了优选。(1)丹参茎叶药材指纹图谱的建立:运用UPLC技术建立了丹参茎叶药材的指纹图谱分析方法,所建立的指纹图谱分析方法,分析迅速,灵敏度高,化学指纹信息完整,色谱峰分离度好,特征明显,可以比较全面的控制该药材的质量。运用改分析方法对收集自不同产地的丹参茎叶药材进行指纹图谱分析,结果表明,确定了15个共有峰,10批丹参茎叶样品相似度在0.884~0.984之间,且其共有峰的相对保留时间的RSD值均小于2%,说明建立的指纹图谱方法灵敏、快速,适合于丹参茎叶药材的指纹图谱研究和质量控制。(2)丹参茎叶药材质量标准的建立:对丹参茎叶药材分别从性状鉴别、显微鉴别(粉末、石蜡切片)、灰分检查以及丹参茎叶中酚酸类成分和黄酮类成分的定量分析等方面对丹参茎叶的质量标准进行研究。结果显示,丹参茎叶的组织显微结构特征明显;薄层色谱鉴别中迷迭香酸、丹酚酸B、芦丁与异槲皮苷的色谱斑点清晰,分离度良好;HPLC色谱中各成分丹参素、原儿茶醛、咖啡酸、芦丁、异槲皮苷、迷迭香酸、紫草酸和丹酚酸B分别在线性范围内与峰面积呈良好的线性关系,且各成分之间分离良好。所建立的定性和定量分析方法操作简单、灵敏度高、重现性好,可用于客观评价丹参茎叶药材的品质及其质量控制。(3)丹参茎叶药材干燥加工技术的优选:分析评价了晒干、阴干、热风干燥、红外干燥、微波干燥等5种干燥技术对药材品质的影响,同时控制干燥温度和对部分样品进行杀青处理,丹酚酸类和黄酮类资源性成分为指标并结合干燥样品的外观性状,明确丹参茎叶适宜的干燥加工方法。结果发现,微波干燥和杀青干燥所获得的丹参茎叶外观性状相对较好。而从内在有效成分含量上看,杀青干燥与晒干效果较好,所得丹参茎叶有效成分含量相对较高。综合考虑干燥效率及干燥品质,本实验选择杀青-热风干燥-60℃为丹参茎叶的最优干燥条件。第四章在建立丹参药材干燥过程水分动力学数学模型的基础上,优选出丹参药材的适宜干燥加工技术,并对干燥过程中丹参中资源性化学成分的动态变化进行研究,探讨其转化机制。(1)丹参药材水分动力学数学模型的建立:分别测定丹参药材在40℃、50℃、60℃和70℃温度下的热风干燥、红外干燥和微波干燥的干燥曲线和水分有效扩散系数,并利用薄层干燥数学模型对丹参干燥过程进行描述。实验结果表明:丹参干燥只经历降速阶段,水分扩散在丹参干燥的过程中起主导作用,并构建丹参药材干燥的数学模型为Page模型,模型的预测值与实验实际值比较吻合,Page模型可较好地预测丹参药材在不同干燥过程中的水分脱除规律。(2)丹参药材干燥加工技术的优选:对丹参不同干燥方法下药材品质的评价是通过建立一个同时检测10种丹酚酸类成分和6种丹参酮类成分的UPLC-TQ-MS方法:Acquity UPLC BEH C18色谱柱(100mm ×2.1 mm,1.7μm);流动相:0.1%甲酸水(A)-乙腈(B),梯度洗脱(0~6 min,3%~30% A;6-7 min,30%~40% A;7~10 min,40%~95%A;10~12 min,95% A;12~12.2 min,95%~3% A)。流速:0.4 mL.min-1,柱温35℃,进样量:2μL。结果表明:温度对丹酚酸类成分影响显著,在相同温度下,不同的干燥处理方法对丹参的品质也有一定影响。TOPSIS综合评价结果显示,红外干燥50℃是丹参药材较为适宜的现代干燥方法。(3)以红外干燥方法对丹参药材进行处理,在干燥过程中不同干燥时间取样,采用HPLC技术分析丹参中的各类资源性化学成分。结果显示:与新鲜丹参药材相比,丹参中各丹酚酸类成分含量均有不同程度的增加,其中以迷迭香酸和丹酚酸B增加最多,且变化趋势最为明显,分别增加了30倍和44倍。与丹酚酸类成分不同的是,丹参酮类成分也一定量地存在于丹参新鲜药材中,但是其含量在干燥过程中也都有不同程度地增加。通过以上对丹参茎叶资源化学及质量标准研究,示范性的研究传统非药用部位的利用价值模式,研究其中的资源性化学物质,采用不同方法提升其资源利用效率,为系统的分析评价及有效开发非药用部位提供科学依据,这对促进丹参资源产业链的延伸具有重要的现实意义和长远战略意义;同时,丹参资源利用效率的提升有利于推动中药产业的绿色经济的发展,产生社会、经济、生态效益。
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