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白藜芦醇(Resveratrol,简称Res),其化学名为3,5,4’-三羟基-反-二苯乙烯(3,5,4’-trihy droxysitlbene),又名芪三酚,是一种重要的植物抗毒素,存在于虎杖、葡萄、花生等植物中,在葡萄果皮和花生根中含量尤为丰富。它具有多种生物活性,是一种天然的抗氧化剂,可以降低血脂,抑制血小板凝结,抗癌,抗炎,抗辐射,抗衰老,防治心血管疾病等。它与紫杉醇都被誉为绿色抗癌药物。但自然界中存在的白藜芦醇的含量较少,利用生物技术生产白藜芦醇有望高效生产白藜芦醇。白藜芦醇合酶(Resveratrol synthase,简称RS)是白藜芦醇合成的关键酶,本研究利用烟草根特异表达启动子驱动花生白藜芦醇合酶基因在烟草根部的表达来生产白藜芦醇。本研究得到如下结果：1、以有机溶剂浸提法提取闽花6号花生三叶期的根、茎、叶、下胚轴中的白藜芦醇,以RP-HPLC法检测其含量,发现各组织器官中的白藜芦醇含量不等,且下胚轴中不含有白藜芦醇,其含量呈现根>叶>茎>下胚轴的趋势。2、利用PCR的方法,根据本实验分离得到的1503bp的NtR12启动子序列设计引物,从烟草基因组中克隆出烟草根、茎特异表达启动子NtR12,测序后得到5个序列有差异的启动子序列,通过利用PLACE database (availabled at http://www.dna.affrc.go.jp/PLACE/signalscan.html; Higoetal.1999)分析了该启动子的序列,该序列具有TATA-box, CAAT-box, ROOTMOTIFTAPOXl等顺式作用元件,具有典型的根特异表达启动子的特征。3、构建了烟草根(或含茎)部特异表达载体pB1121-NtR12-GUSA、pBI121-NtR12-RS,将本研究构建的两个载体与pBI121-NtR2-RS、pBI121-NtR6-RS载体经农杆菌介导转化本生烟草和烟草优良品种翠碧一号获得了转基因植株。4、用发根农杆菌001和发根农杆菌002分别侵染本生烟草和烟草优良品种翠碧一号无菌苗,进行无菌培养,发现发根农杆菌001侵染CB-1烟草、发根农杆菌002侵染本生烟草有利于进行快速发根,指出发根农杆菌诱导发根因菌株和植物寄主不同而异。将经过Kan筛选得到的转基因芽,分别进行自然生根培养和利用发根农杆菌诱异发根,发现用发根农杆菌侵染烟草可显著促进根的生长。5、将经过发根农杆菌侵染诱导的毛状根进行液体培养,发现液体培养可使毛状根大量生产,其生长速率比固体培养基快。6、提取转基因烟草叶片的DNA,经PCR检测以及根、茎、叶的RNA的提取、RT-PCR检测,证明已获得阳性植株,其白藜芦醇的提取鉴定尚待分析；经过发根农杆菌诱导的转基因烟草根中的RNA提取、RT-PCR验证以及白藜芦醇的提取鉴定也在进行中。