少见真菌性脑膜炎的临床及病原学诊断

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目的:近年来,随着广谱抗生素、肾上腺糖皮质激素、免疫抑制剂的长期广泛应用,及艾滋病感染者在全球范围的增加,使真菌性脑膜炎的患病率明显增加,在我国,隐球菌性脑膜炎仍为主要的中枢神经系统真菌感染性疾病,其诊断手段已较为成熟,而其他少见真菌如毛霉菌、镰刀菌等引起的中枢神经系统感染性疾病,临床表现不具有特异性,病原学诊断方法较少。本文通过对两例少见真菌性脑膜炎的临床及病原学研究,为今后此类疾病的诊断及治疗提供一定的依据。方法:实验对象为河北医科大学第二医院神经内科2010年5月入院的镰刀菌性脑膜炎的患者1例及白求恩和平医院神经内科2007年2月入院的鼻脑侵袭性毛霉菌病患者1例。以镰刀菌性脑膜炎为主要研究对象,在疾病的不同时期行腰椎穿刺术,脑脊液进行常规、生化、细胞学系列的检查(包括涂片脑脊液细胞学MGG染色、脑脊液细胞学阿利新兰染色、墨汁染色)。同时将脑脊液送于我院检验科进行细菌、真菌培养,对培养得到的病原菌进行光镜、扫描电镜、透射电镜观察。对送检于我实验室的鼻脑侵袭性毛霉菌病患者的脑脊液进行细胞学观察。结果:1镰刀菌性脑膜炎1.1脑脊液常规及生化:外观无色透明,细胞总数及白细胞数随病情进展而增加,蛋白含量也随病情进展而升高;经治疗后,细胞数及蛋白含量相应下降。1.2脑脊液细胞学系列的检查:在疾病早期,脑脊液细胞学以淋巴细胞反应为主,随病情进展,呈以嗜中性粒细胞为主的混杂细胞反应为主,经治疗,嗜中性粒细胞比例下降,淋巴细胞比例升高。1.3病原学检测:脑脊液细胞学MGG染色、阿利新兰染色、墨汁染色均未发现病原菌,脑脊液培养有真菌生长,经鉴定为镰刀菌,脑脊液检测(1,3)-β-D-葡聚糖即G试验结果阳性。1.4基础疾病的情况:血液系统疾病、免疫系统疾病、AIDS及糖尿病等检查均未发现,曾有禽类、犬类及农作物接触史。1.5扫描电镜观察:分生孢子散生在絮状菌丝间,形态不一,有棍棒形,圆形,菌丝呈分枝状,粗细不均,表面可见皱褶。1.6透射电镜观察:细胞壁薄厚不均一,边界较清,内侧的细胞膜结构不清,未见细胞核,细胞质内可见较多核糖体,低电子密度的囊状物、膜状结构,大小不等的透明空泡。2鼻脑侵袭性毛霉菌病脑脊液细胞学检查,MGG染色呈以嗜中性粒细胞反应为主的混合细胞学反应,可见毛霉菌,菌丝部分管状,局部膨大、扭曲。结论:1真菌性脑膜炎的发病率正在逐年上升,特别是少见真菌的感染有所增加,其误诊率、病死率很高,早期诊断、早期治疗至关重要。2脑脊液细胞学的检测对常见病原体的诊断有一定帮助,但对于少见真菌往往镜下无法直接发现,送检脑脊液真菌培养、细菌培养对确诊有较大帮助,G试验对临床有较大的提示作用。3真菌性脑膜炎易发生在有免疫缺陷的患者中,对于有基础疾病的患者如果出现脑膜炎的临床表现时应高度警惕此病。4真菌种属的鉴定主要依靠形态学,电镜技术的发展为进一步明确菌种提供了依据。
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