【摘 要】
:
目的:利用胰腺组织裂解液诱导BMSCs定向分化为胰岛样结构。对胰岛样结构进行鉴定和初步评价,同时探讨细胞分化、发育过程中,形态的变化与相关基因表达规律的关联性。方法:使
论文部分内容阅读
目的:利用胰腺组织裂解液诱导BMSCs定向分化为胰岛样结构。对胰岛样结构进行鉴定和初步评价,同时探讨细胞分化、发育过程中,形态的变化与相关基因表达规律的关联性。方法:使用胰腺组织裂解液做为诱导剂,构建微环境,BMSCs做为种子细胞,构建组织工程化胰岛;倒置显微镜下观察形态、结构的变化。石蜡包埋组织切片HE染色观察组织结构、细胞分布;以DTZ染色筛选细胞团;Mallory染色初步检定细胞成分;SEM、TEM观察超微结构。免疫荧光组织化学法检测相关蛋白(胰岛素、胰高血糖素、C肽、生长抑素、vEGF、vWF、Nestin、CK-19、Ⅰ型胶原蛋白、Ⅲ型胶原蛋白、Pdx-1、Ngn3、MafA)。根据细胞分化过程中的形态变化规律,将分化过程分为三个阶段(Induced cells、Islet-like cells、Islet-like clusters),采用q RT-PCR检测三个阶段Pdx-1、Ngn3、MafA、Insulin、Glucagon。结果:1.组织工程化胰岛具有结缔组织样被膜包裹,内含α样细胞、β样细胞和δ样细胞等胰岛内分泌细胞成分;结构内可见内皮样细胞;同时检测到以Ⅰ型胶原蛋白为主的胶原纤维。2.α样细胞和β样细胞规律分布,与正常胰岛结构相似。3.TEM观察,结构内可检测到四类含分泌颗粒的细胞,细胞质内可见多级溶酶体及大量空泡。4.免疫荧光组织化学染色检测:胰岛素、胰高血糖素、C肽、生长抑素、vEGF、v WF、Nestin、CK-19、Ⅰ型胶原蛋白、Ⅲ型胶原蛋白、Pdx-1、Ngn3、MafA随诱导时间的延长,阳性细胞数逐渐增多,荧光强度逐渐增加。5.qRT-PCR检测:Pdx-1、Ngn3、MafA、Insulin、Glucagon基因表达有规律。结论:组织工程化胰岛由多种体细胞组成,结构内可检测到α样细胞、β样细胞、δ样细胞、内皮样细胞、外分泌腺样细胞,及包含以I型胶原蛋白为主的胶原纤维。组织工程化胰岛具有初级的内、外分泌腺细胞功能活动的结构。BMSCs分化为胰岛样结构的过程,其发生、分化的相关基因表达具有时序性,与胰岛正常发育过程相似。BMSCs在特定微环境下,自然的分化趋势是形成多种体细胞,最终发育为组织样结构。
其他文献
紫杉醇是一种广泛的抗癌药物,可以有效的治疗多种类型的癌症其中包括卵巢癌,肺癌,乳腺癌和非小细胞肺癌等。紫杉醇是从生长缓慢的紫杉树皮中分离出来的,供应量非常有限,生产成本高,从天然红豆杉树中分离紫杉醇是环境不可持续的。目前紫杉醇的分离纯化工艺中存在回收率低、在分离纯化过程中会造成溶剂的大量浪费,污染环境等问题。另外,天然药物的缓释载体的控制释放特性,以及生物可降解性是研究的重点。针对上述问题,本论文
远程打样(Remote Proofing)是指利用网络环境将数字文件传送到客户处,直接通过安装在客户端的数字打样设备输出样张的打样方式。虽然远程打样正在成为未来打样方式的主流,但要成
近日,珠海市政府出台了对困难企业实施“三补一缓缴”政策,按规定实行社会保险补贴、岗位补贴和在岗职工职业技能培训补贴,允许困难企业在一定期限内缓缴社会保险费.以帮助受金融
公开课是中小学重要的教学活动,在课程改革的推动下,公开课的开展更是如火如荼。公开课的开展对教师专业成长起着很重要的作用,那么这种特殊课型对学生学习又有着怎样的影响呢?因此,本文从伦理关怀的视角出发,围绕“公开课中的学生学习得失”展开研究,主要探索三个问题:1.公开课中的学生学习得失现状如何?2.公开课缺失伦理关怀的原因是什么?3.如何改善公开课,让公开课充满伦理关怀光辉?基于已有的研究,首先对“伦
质量认证也叫合格评定,是国际上通行的管理产品质量的有效方法。质量认证按认证的对象分为产品质量认证和质量管理体系认证两类;按产品认证可分为安全认证和合格认证。产品质量
【正】 欧洲共同体与美国的经济关系既有相互依存、合作的一面,又有相互矛盾、竞争的一面。这种经济关系是由双方经济力量对比及各自的经济利益所决定,受客观经济规律支配,同
2010年恰逢中国包装联合会建会30周年。12月8日,中国包装联合会在海南隆重举行”2010包装中国颁奖盛典”,世界包装组织副主席,亚洲包装联合会主席、中国包装联合会石万鹏先生
[摘要] 目的 探讨Singh分类对股骨近端防旋髓内钉治疗老年骨质疏松性股骨转子间骨折的影响。 方法 87例老年骨质疏松性股骨转子间骨折患者均采用股骨近端防旋髓内钉治疗,根据Singh分类法分为Ⅰ~Ⅴ5组,比较各组术中、术后各指标及Harris评分。 结果 各组术中出血量、手术时间、住院时间、骨折愈合时间、功能恢复时间差异均有统计学意义(P均<0.05),各组术后并发症发生率差异无统计学意义(P
2007年至今,北京市水产科学研究所小汤山养殖基地引进选留了一定数量的花罗汉亲鱼进行培育,研究并掌握了其繁殖与养殖的规律,为大面积推广做好了准备工作。现将花罗汉人工繁殖技
1月5日,施耐德电气在厦门召开新闻发布会,面向中国市场推出MachineStruxure(TM)机器自动化平台,结合本土需求为工业机器提供整体的自动化解决方案。施耐德电气工业事业部OEM解