转录因子NF-κB广泛存在于真核细胞内,能与多种蛋白基因启动子或增强子序列特定位点发生特异性结合从而促进基因的转录和表达,调节免疫应答、细胞增殖、转化和凋亡等重要的病理生理过程。近年来关于TCR诱导NF-κB激活的机制已经取得很多突破,但IKK复合体的激活机制仍不明确,IKK复合体调节亚基NEMO的调节机制同样存在许多未知。　　 为研究NEMO在TCR诱导NF-κB信号通路激活过程中的确切功能和机制,本研究利用RNA干扰技术,构建了稳定干扰NEMO的Jurkat T细胞系si-NEMO,并以其为研究对象,结合IκBα降解、p65入核及NF-κB报告基因的研究结果,阐述了NEMO在TCR诱导经典NF-κB激活过程中发挥的作用及特异性；通过分析NEMO和IKKβ等蛋白在细胞亚组份中的分布,进一步研究了NEMO在TCR/NF-κB激活过程中的作用机制；另外,本研究还对NEMO SUMO化修饰与TCR诱导NF-κB通路激活的相关性进行初步探讨。　　 主要研究结果如下:　　 (1)TCR刺激能够更快更彻底地诱导si-NEMO细胞中IκBα的降解,同时也显著增强p65入核和NF-κB报告基因的活性,但MAPKs的激活不受影响。Jurkat E6.1细胞中超表达NEMO能够显著抑制基础和TCR诱导的NF-κB活性,而与Jurkat E6.1相比,si-NEMO细胞在静息状态和刺激条件下的增殖明显增强。提示内源NEMO对于TCR诱导经典NF-κB信号通路的激活可能具有抑制作用。　　 (2)与TCR刺激结果相反,在si-NEMO细胞中,LPS和TNF-α诱导的IκBα降解均受到显著抑制,表明NEMO可能特异性地抑制TCR介导NF-κB信号通路的激活。　　 (3)细胞亚组分分离实验证实,与Jurkat E6.1和NC细胞相比,在si-NEMO细胞中,TCR诱导PKCθ在细胞膜及脂筏上的聚集状况无明显差异,但Bcl10、TRAF-6、IKKβ在细胞膜尤其是脂筏上的聚集量均有明显增加,其中IKKβ在脂筏上迅速且持续聚集动态地对应IκBα的迅速持续降解,说明IKKβ在脂筏上迅速而持续的聚集对于TCR/NF-κB信号通路起到主要作用:而TRAF-6脂筏上聚集量的显著增加对于TCR诱导si-NEMO细胞中NF-κB的持续激活可能起到重要作用。TCR刺激T细胞后,内源及外源超表达的NEMO主要转位到细胞脂筏上,提示NEMO通过快速而持续的脂筏转位实现对TCR/NF-κB信号通路的抑制作用。　　 (4)TCR诱导T细胞后,检测细胞中Bcl10蛋白水平,发现Bcl10在si-NEMO细胞中的降解程度明显强于Jurkat E6.1细胞；利用蛋白酶抑制剂MG132处理细胞后,发现Bcl10降解不依赖于蛋白酶体途径,且Bcl10降解与NEMO无关。　　 (5)TCR诱导条件下NEMO不发生SUMO化修饰；NEMO同源聚合体的形成不依赖于SUMO化修饰。