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本论文由三部分组成。第一部分介绍了金丝桃属植物黄海棠及北栽秧花化学成分的分离纯化及结构鉴定。第二部分介绍了具有抗疱疹病毒活性的夏枯草多糖提取纯化工艺的研究。第三部分综述了国内外对植物多糖研究的发展状况及其应用前景。 第一部分:对黄海棠及北栽秧花的化学成分进行了分离纯化及结构鉴定。利用正相、反相硅胶柱层析及制备液相色谱等分离手段,同时运用MS、NMR等现代波谱分析技术,分别从黄海棠和北栽秧花中分离鉴定了15个化合物和21个化合物。 1.黄海棠分离鉴定的化学成分9,9-O-di-(E)-feruloyl-(-)-secoisolariciresinol(1)、山奈酚(2)、槲皮素(3)、金丝桃苷(4)、槲皮素-3-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(5)、山奈酚-3-O-β-D-吡喃半乳糖苷(6)、山奈酚-3-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(7)、原儿茶酸(8)、1,7-二羟基酮(9)、对香豆酸(10)、对羟基苯甲酸(11)、山奈素-3-O-(6”-O-巴豆酰)-β-D-葡萄糖苷(12)、1,3,6,7-四羟基酮(13)、没食子酸(14)、β-谷甾醇(15)。其中1,4,7-14化合物首次从该植物中分离得到。 2.北栽秧花分离鉴定的化学成分3,4-O-异亚丙基莽革酸(1)、莽草酸(2)、原儿茶酸(3)、咖啡酸(4)、苯甲酸(5)、绿原酸(6)、绿原酸甲酯(7)、1,3,6,7-四羟基(8)、4-羟基-2,3-二甲氧基酮(9)、1,5-二羟基-2-甲氧基酮(10)、C-3/C-8"双芹菜素(11)、山柰酚(12)、槲皮素(13)、槲皮苷(14)、槲皮素-3-O-β-D-吡喃阿拉伯糖苷(15)、金丝桃苷(16)、异槲皮苷(17)、黑燕麦内酯(18)、杜鹃素(19)、1-单甘油酯(20)和β-谷甾醇(21)。化合物均首次从该植物中分离得到,其中化合物18、20为首次从金丝桃属植物中分离得到。 第二部分:主要对对夏枯草多糖的提取工艺进行了研究,具体内容如下: 采用紫外分光光度法,依据《药典》,建立了夏枯草多糖中中性多糖的测定方法硫酸-蒽酮法、糖醛酸的测定方法间羟联苯法,并对其重复性、精密度及加样回收率等进行了考察,结果表明两种方法准确、稳定、可靠。 通过单因素试验和正交试验(L9(34)),以多糖含量及浸膏得率为指标,考察了提取时间、料液比、提取次数对水提夏枯草多糖(PVP)的影响,确定了最佳提取工艺,即在提取次数:3次;提取时间:1.5 h;料液比:第一次为14倍,第二、三次为12倍;温度:100℃的条件下,PVP的最高提取率最高,为18.68mg/g。 以多糖纯度及抗HSV-1活性为指标,经醇沉、不同柱层析技术、切向流技术等方法初步对PVP进行纯化,以得到安全、有效、质量可控的PVP。结果表明切向流技术最为理想。综合生产工艺,最终选择膜包的分子量为100 KD。其得到的多糖(XKC100 KD)的抗HSV-1活性的IC50值为:64.278 ug/mL。并对其结构进行了初步的表征,HPGPC结果表明其重均分子量主要为1.4479×106 Da,3.3014×104Da; GC结果表明其单糖组成及比例为:Rha∶Ara∶Xyl∶Glc∶Gal=1∶8.4∶7.7∶1.1∶1.6,糖醛酸的含量为24%。 第三部分:结合我们课题的研究,综述了近些年来国内外对于多糖提取、纯化及结构表征研究的发展状况,为今后的深入研究探寻方向,具有参考价值。