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氧化应激是导致糖尿病肾病(DN)的一个重要原因。上调抗氧化因子核因子相关因子2(Nrf2)可以延缓DN的病情进展。本研究旨在探讨Nrf2激动剂萝卜硫素(SFN)和小剂量蛋白酶体抑制剂MG132对小鼠DN的防治作用。为探讨SFN对DN的预防作用，我们采用小剂量多次注射链脲佐菌素的方法建立1型糖尿病小鼠模型，并与模型建立成功的同时给予糖尿病小鼠及同龄对照小鼠SFN干预3个月(0.5mg/kg/day，每周5天)，处死第一批小鼠(3个月组)，收集血液、尿液及肾脏标本；第二批小鼠停止SFN干预并继续喂养3个月后处死(6个月组)，收集相应标本。为探讨蛋白酶体抑制剂MG132对DN的治疗作用，我们给予3月龄转基因1型糖尿病(OVE26)小鼠腹腔注射MG132(10μg/kg/day)，此时OVE26小鼠已表现为肾功能异常(尿蛋白增加)。MG132治疗3个月后，处死小鼠，收集相应标本。我们应用Real-time PCR、Westernblot、免疫组织化学以及相关试剂盒检测肾脏功能学、形态学及生物化学等指标。此外，我们尚在体外培养人肾小管上皮细胞(HK11)，通过给予高糖/高脂和SFN、MG132等处理模拟体内实验，并应用Nrf2特异性siRNA沉默HK11细胞的Nrf2基因，从而探讨Nrf2在SFN和MG132防治DN过程中的核心作用。SFN预防实验结果显示，与糖尿病(3个月)组小鼠相比，糖尿病+SFN (3个月)组小鼠肾脏氧化损伤、炎症、纤维化以及肾脏结构和功能的改变均显著减轻，并伴随Nrf2表达增加和活性增强；而SFN的这种肾脏保护作用以及Nrf2的上调在停止SFN干预的6个月组小鼠中未能持续。MG132治疗实验结果显示，与同龄未治疗的糖尿病小鼠相比，经MG132治疗的糖尿病小鼠肾脏病理和功能均明显改善。MG132的治疗作用伴随着肾脏Nrf2蛋白表达增加以及Nrf2下游抗氧化基因转录水平上调。此外，我们尚发现糖尿病时肾脏蛋白酶体活性显著增加，MG132治疗3个月可以使其降低。体外实验结果表明，经Nrf2特异性siRNA预处理，SFN和MG132对高糖/高脂导致的Nrf2及其下游抗氧化基因的上调作用均明显减弱，并且高糖/高脂诱导的HK11细胞高结缔组织生长因子表达被完全逆转。以上结果表明，SFN干预3个月可以预防1型糖尿病所致的肾脏损伤，但具有非持续性；小剂量MG132治疗3个月可以减轻1型糖尿病所致的肾脏氧化损伤、炎症以及纤维化；Nrf2激动剂SFN对DN预防作用可能系通过上调Nrf2的蛋白表达，增强Nrf2活性；MG132通过上调Nrf2而发挥其对DN的治疗作用可能依赖于抑制蛋白酶体活性。