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研究背景和目的： 结直肠癌（colorectal cancer,CRC）最常见的恶性肿瘤之一，近年来我国结直肠癌的发病率和死亡率都迅速呈持续上升，2015年确诊的CRC为37.63万例，死亡人数19.1万人。既往研究认为，CRC是遗传变异与环境暴露之间相互作用下，多因素作用、多步骤发展的结果。最近的研究表明，饮酒是结直肠癌的确定危险因素，但乙醇的代谢是否以及在何种程度上影响 CRC 的发病目前尚待阐明。乙醇在机体内的代谢主要由乙醇脱氢酶1B（alcohol dehydrogenase 1B,ADH1B）、细胞色素P4502E1（cytochrome P450 2E1, CYP2E1）和乙醛脱氢酶-2（aldehyde dehydrogenase 2, ALDH2）完成。既往对乙醇代谢相关基因对CRC遗传易感性影响的研究主要集中于单核苷酸多态性（single nucleocide polymorphism, SNP），但包含我们在内的前期研究表明，ADH1B、ALDH2和CYP2E1这三个基因的SNPs与结直肠癌发病风险关联的结果在不同的研究中并不完全一致。拷贝数变异（copy number variation,CNV）通常是指大于1kb的DNA片段的改变，包括重复，缺失或插入等，是基因组最常见的遗传变异形式，占人类变异的10％~13％。与SNP 相比，CNV 的突变率更高、对基因组的影响范围更大。近年来的研究提示，CNV与多种肿瘤包括CRC的易感性可能有关，但由于技术和分析上的困难，目前CNV与疾病关系的研究仍相对较少。而乙醇代谢相关基因的CNV是否与CRC发病风险有潜在影响目前尚无研究报道。 因此，在前期研究基础上，本研究对乙醇代谢通路基因的功能单核苷酸多态与结直肠癌风险关联进行meta分析后，提示了乙醇代谢基因的遗传变异与CRC风险之间的显著关联；进而，我们再采用多重基因拷贝数定量方法AccuCopyTM对ADH1B、CYP2E1和ALDH2 三个靶标基因的 CNV进行检测，分析其与结直肠癌风险的关联，以进一步明确乙醇代谢基因变异对 CRC 的影响。为解释酒精摄入和遗传变异的交互作用在结直肠癌发病中的作用和机制提供新的线索，为易感人群提供有效的保护和干预措施。 方法： 在PubMed和中国知网（CNKI）搜索更新至2016年12月出版的所有关于ADH1B， ALDH2或CYP2E1基因多态性与结直肠发病风险相关的文献。根据纳入和排除标准筛选出符合条件的文献，所有数据由两名研究者独立提取，使用纽卡斯尔渥太华量表（NOS）评估纳入研究的质量。在等位基因模型，显性模型，隐性模型和纯合子模型中通过计算合并之后的比值比（OR）与95％置信区间（95％CI）评估ADH1B，ALDH2和CYP2E1基因单核苷酸多态性与结直肠癌易感性之间的关联。使用I2指数来评估异质性，敏感性分析评估结果的稳定性，Begg’s漏斗图和Eegg’s线性回归评估发表偏倚。 采用多重基因拷贝数定量方法AccuCopyTM对来自中国西南地区的449例CRC病例和449例无癌对照样本中的ADH1B，ALDH2和CYP2E1基因拷贝数进行检测，为确保基因分型结果的准确性，对每个基因设计了2~3个探针（2~3对引物）和四个用于标化的参照 DNA 片段（2p，10pL，20q，16p），随机选取 10%的样本进行拷贝数验证，采用非条件Logistic回归分析CNV与CRC风险之间的关联。 结果： 1. 共纳入38篇符合条件的文章进行meta分析，其中包括8篇关于ALDH2的相关文献，20篇关于CYP2E1的文献，8篇ALDH2和ADH1B的共同文献，和2篇ALDH2， ADH1B和CYP2E1共同文献。结果显示：在单个SNP位点中，ADH1B基因rs1229984在隐性遗传模型中与CRC的发病具有关联，携带AA基因型会增加患CRC的风险（AA vs. GG+GA，OR = 1.34，95％CI：1.02-1.74，P= 0.032）；CYP2E1基因rs2031920在等位基因模型、隐性模型和纯合子模型中与CRC风险增加有关（T vs. C，OR = 1.39，95％CI：1.00-1.43，P= 0.053；TT vs. CC + CT，OR = 1.38，95％CI：1.06-1.79，P= 0.016；TT vs.CC，OR = 1.39，95％CI：1.07-1.80，P= 0.015）；CYP2E1基因96-bp插入在等位基因模型（Insert vs. Non-insert，OR=1.2，95%CI：1.06-1.35，P=0.005）和显性模型中（Non-insert-insert +Insert–insert vs. Non-insert–non-insert，OR=1.24，95%CI：1.07-1.45， P=0.005）与CRC的风险有关；而ALDH2基因rs671和rs886205，CYP2E1基因 rs3813867和rs6413432与CRC的风险无显著关联。基于基因多位点的联合分析结果提示：ADH1B基因多态性在隐性模型中与CRC风险增加有关（BB vs. AA+AB，OR =1.29，95％CI：1.02-1.62，P= 0.032）；CYP2E1基因多态性在等位基因模型,隐性模型和纯合子模型中与CRC风险增加有关（B vs. A，OR = 1.25，95％CI：1.09-1.43，P= 0.001；BB vs. AA+AB， OR = 1.19，95％CI：1.05-1.34，P= 0.006；BB vs. AA，OR = 1.24，95％CI：1.09-1.42， P= 0.001）；ALDH2基因多态性在显性模型中与患CRC的风险降低有关（AB+BB vs. AA， OR = 0.94，95％CI：0.88-1.00，P= 0.034）。基于全通路ADH1B，ALDH2和CYP2E1基因上所有位点的分析结果提示在隐性模型（OR = 1.12，95％CI：1.04-1.21，P= 0.002）和纯合子模型（OR = 1.14，95％CI：1.05-1.24，P= 0.002）中与CRC的风险增加有关。 2. 对 ALDH2，ADH1B 和 CYP2E1 三个基因的拷贝数检测结果显示：ADH1B 和ALDH2基因拷贝数在CRC病例和对照人群中均为2拷贝。但CRC患者中CYP2E1拷贝数增加的频率高于对照人群（χ2=3.98，P=0.046），非条件Logistic回归分析结果提示CYP2E1拷贝数增加可能是CRC发生的危险因素（OR=2.47，95%CI：1.04-5.85，P=0.041）。分层结果显示，CYP2E1拷贝数增加在年龄>50岁（OR=3.18，95%CI：1.19-8.53，P=0.021），肿瘤位于结肠（OR=3.17，95%CI：1.1-8.91，P=0.028），乙醇摄入量≤50g（OR=2.27， 95%CI：1.01-6.53，P=0.048）的人群中与CRC风险具有关联。 结论： 1.ADH1B / ALDH2 / CYP2E1基因多态性是结直肠癌的危险因素，特别是ADH1B的rs1229984，CYP2E1的rs2031920和96-bp插入。而ALDH2的rs671和rs886205和CYP2E1的rs3813867和rs6413432与结直肠癌的发病风险无关。 2. CYP2E1拷贝数变异与中国西南地区人群CRC的发病密切相关，其拷贝数增加可能会增加CRC的发病风险。分层后发现CYP2E1拷贝数增加主要在年龄>50岁，肿瘤位于结肠和乙醇摄入量≤50g 的人群中与CRC风险具有关联。