体外CIK细胞的细胞因子表达谱研究

来源 :华东师范大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:chenjason886
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   本文对体外CIK细胞的细胞因子表达谱进行研究,文中采用Ficoll分层液从健康人外周血中分离得到非黏附性淋巴细胞,采用抗CD3单克隆抗体包被瓶培养的方法,用细胞因子IFN-γ、IL-1、IL-2刺激和诱导使其分化成具有CD3+CD56+表型特征的CIK细胞。用流式细胞仪进行表型检测,以确定效应细胞的纯度和质量。用台盼蓝染色和FACS鉴定细胞的存活率,用MTT法检测CIK的肿瘤杀伤活性。以人GAPDH为参照基因,RT-PCR定性和半定量检测在培养的第6、10、20和30d四个时期CIK细胞的IFNs、IL、TNF家族和TGF家族成员中的25个细胞因子的表达情况。用SYBR Green I掺入的Real-TimePCR技术进行定量,探讨了CIK细胞的细胞因子表达随着培养时间延长的变化,揭示了目标细胞因子与CIK细胞抗肿瘤和抗病毒作用间的关联。构建和克隆了新的细胞因子IFN-λ2全长cDNA。
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