论文部分内容阅读
决明子为豆科植物决明（Cassia obtusifolia L.）或小决明（Cassia tora L.）的干燥成熟种子,现在临床使用的主要有生品和炒制品两种。现代研究证明,决明子炒制后,蒽醌苷类物质部分被破坏,泻下作用减弱,致使药性缓和,在临床上主要用于治疗高血脂、高血压、肝肾亏损、青盲内障、头疼头晕等症,而未炒制的决明子主要用于治疗便秘、目赤肿痛等症。对于决明子的炮制,中华人民共和国药典（2005年版,一部）及各省中药炮制规范仅规定“炒至表面微鼓起,微有香气”,却没有区分生决明和炒决明的理化鉴别方法。本课题根据中医药理论和现代药理研究,采用不同的温度和时间对决明子进行炒制,使之均达到药典和炮制规范规定的外观性状,然后,按照决明子中所含有效成分的极性不同,先后用乙酸乙酯和甲醇提取,分别建立了决明子炮制前后脂溶性成分和极性成分的TLC和HPLC指纹图谱,在有效表征决明子炮制前后脂溶性成分和极性成分变化的同时,用HPLC法测定了大黄酚、大黄素甲醚的含量,还采用HPLC-MS联用技术对极性成分指纹图谱中的主要色谱峰进行了初步结构解析。在决明子脂溶性成分的TLC指纹图谱中得到包括大黄素、大黄酚、大黄素甲醚在内的7个分离良好的斑点,炮制品各斑点颜色明显比生品各斑点颜色深;决明子极性成分的TLC指纹图谱揭示了生、炒决明的不同,与生品的TLC指纹图谱相比,炮制品的TLC指纹图谱中增加了一个橙红色斑点,有两个斑点的颜色发生明显改变,其他斑点也有颜色深浅的变化。本课题建立的决明子极性成分的TLC指纹图谱操作简便、重现性较好,能很好地反映决明子炮制后化学成分的变化,为生、炒决明子的区分提供了有益的理化鉴别方法。在生、炒决明子脂溶性成分HPLC指纹图谱的建立和研究中发现,炮制后,各种脂溶性成分含量明显升高,并且有新成分生成。新成分的生成可以作为鉴别决明子生品与炮制品的特征。决明子脂溶性成分的HPLC指纹图谱揭示了决明子在炮制过程中脂溶性成分的变化,及不同炮制条件下制得的炒决明中脂溶性成分含量的差异,结果显示,炮制条件改变对决明子脂溶性成分含量有影响。决明子生品及炮制品极性成分的HPLC指纹图谱显示,决明子炮制后不但有新成分生成,而且极性成分含量下降。研究结果表明,相同的炮制温度,炮制时间延长,极性成分含量降低;相同炮制时间,炮制温度越高,极性成分含量降低越多。本课题对决明子极性成分HPLC指纹图谱中典型色谱峰采用HPLC-MS联用技术进行结构分析,证明了本实验条件建立的HPLC指纹图谱能反映决明子苷B、B2,决明子苷C,决明子苷,红镰霉素龙胆二糖苷,去甲红镰霉素龙胆二糖苷,大黄酚-1-O-β-D-吡喃葡萄糖基-（1→3）-β-D-吡喃葡萄糖基-（1→6）-β-D-吡喃葡萄糖苷、大黄酚-四吡喃葡萄糖苷在炮制过程中的变化。本课题建立了能反映决明子炮制前后化学成分特征的TLC、HPLC指纹图谱,所建立的TLC、HPLC指纹图谱为规范决明子炮制工艺、完善决明子质量标准提供了有益的参考。