第一部分鼠疫F1抗原单克隆抗体的制备和鉴定目的制备抗鼠疫耶尔森菌(鼠疫杆菌)F1荚膜抗原(F1抗原)的单克隆抗体(F1McAb),鉴定其特性,为制备检测鼠疫杆菌的快速检测试剂盒做准备方法用从鼠疫杆菌直接提取的F1抗原免疫BALB/C小鼠,杂交瘤技术制备McAb,间接ELISA法和有限稀释法筛选产生高抗体滴度的杂交瘤细胞株,检测其抗体滴度,分析抗体的亚型,相对亲和力和抗体结合表位;Western Blot和间接ELISA检测其特异性结果得到三株可以稳定分泌抗体的杂交瘤细胞,抗体的亚类分别为IgM,IgG1,IgG1;相对亲和力H3>H2>H1;H1、H3结合相同的抗原表位,H2结合不同的表位,Western Blot显示,其能与F1抗原特异性结合结论已获得抗F1抗原的McAb,为鼠疫快速检测奠定了基础第二部分鼠疫F1抗原胶体金试纸条的制备和初步现场应用目的评价胶体金免疫层析试纸条的敏感性特异性;将鼠疫F1抗原胶体金免疫层析快速检测试纸条用于现场检测方法试纸条分别检测粗制的F1抗原溶液,鼠疫弱毒菌EV76和强毒标准菌株141的菌悬液,确定检测下限。试纸条检测鼠疫杆菌菌株,鼠疫近缘菌株和革兰氏阴性致病菌株共51株的菌悬液,检测其特异性;分别制备实验感染豚鼠、肺鼠疫尸体和肺鼠疫病人的检测样品,快速检测试纸条进行检测结果试纸条可以检出粗制F1抗原5ng/ml,检出鼠疫杆菌EV76和141均为25万个/ml;试纸条可以检测到25个鼠疫菌感染的感染豚鼠材料;肺鼠疫尸体材料的检测结果全部为阳性;肺鼠疫患者样品的检测除1例外也为阳性结论我们成功制备出了检测鼠疫耶尔森菌的快速检测试纸条,快速检测试纸条方便,快捷,适于鼠疫耶尔森菌的检测和监测