基因重组人骨形成蛋白-2诱导成骨机理及其载体释放系统

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骨形态发生蛋白(BMP)是存在于骨组织中的具有诱导分化作用的蛋白质,在胚胎时期骨组织发育和成年骨损伤修复中起着重要作用。从动物骨提取的BMP与不同载体结合已经成功用与于治疗骨折和骨不连,显示了良好的应用前景。但由于BMP提取困难,难以纯化,因而限制了BMP的应用及其机理研究。国外从八十年代开始用真核系统表达BMP并取得成功,但其产量低,成本高等缺点难以满足需要。原核系统表达BMP弥补了上述不足,但其诱导机理及诱导活性有待于进一步研究。本实验目的是探讨原核系统表达BMP的诱导成骨机理及其诱导活性,为其应用提供理论依据。 (1)rhBMP2诱导效应的体内和体外观察 目的:探讨原核表达BMP的体外诱导分化和体内诱导成骨作用。方法:体外实验用不同浓度的rhBMP2刺激原代培养的骨髓细胞,观察对其细胞增殖、碱性磷酸酶活性以及蛋白含量的影响;体内实验采用小鼠肌袋模型,观察0.5mgrhBMP2植入不同时间的组织学变化,并与部分纯化的牛BMP比较。结果:rhBMP2可刺激体外培养骨髓细胞的增殖;提高细胞的蛋白表达水平;对骨髓细胞ALP的影响较为明显,并呈一定的剂量依赖性。体内实验显示rhBMP2植入后的组织学变化与对照的bBMP基本相同。结论:体外和体内实验表明原核
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