【摘 要】
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目的:研究在胃癌进展过程中hTERT基因启动子区CpG位点甲基化状态变化情况,探讨启动子区甲基化和hTERT基因表达及其与端粒酶活性的关系,为胃癌的早期诊断提供理论依据和实验基
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目的:研究在胃癌进展过程中hTERT基因启动子区CpG位点甲基化状态变化情况,探讨启动子区甲基化和hTERT基因表达及其与端粒酶活性的关系,为胃癌的早期诊断提供理论依据和实验基础。方法:提取正常胃粘膜、胃癌前病变、胃癌组织中的基因组DNA。利用亚硫酸氢盐修饰基因组DNA,使hTERT启动子区CpG位点中,未发生甲基化的胞嘧啶(C)变为尿嘧啶(U)。在不含CpG位点的位置设计引物,进行PCR扩增。产物经测序后与原序列比对,汇总每组标本中目的片段所含的27个CpG位点甲基化情况;利用PCR特异性扩增hTERT基因,以琼脂糖凝胶电泳检测其在正常胃粘膜、胃癌前病变、胃癌组织中表达阳性率;采用TRAP法检测正常胃粘膜、胃癌前病变、胃癌组织中端粒酶活性。结果:1.胃癌组织中hTERT启动子区域甲基化程度高于胃癌前病变组和正常组,三组间差异具有统计学意义(P<0.05)。2.hTERT在胃癌中表达阳性率高于胃癌前病变,正常胃粘膜中不表达,三组间的差异有统计学意义(P<0.05)。3.胃癌组端粒酶活性高于胃癌前病变组,正常胃粘膜未检测到端粒酶活性,三组间差异有统计学意义(P<0.05)。结论:正常胃粘膜hTERT启动子区甲基化程度较胃癌前病变和胃癌低,提示在胃癌进展过程中hTERT启动子区甲基化程度逐渐增高,可作为肿瘤早期诊断的潜在分子生物学标记。在胃癌进展过程中hTERT启动子区甲基化程度表达逐渐增高,且该基因表达与端粒酶活性也逐步增高,提示hTERT甲基化可能对该基因的表达和端粒酶活性有调节作用。
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