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本试验于2006年至2008年在青岛农业大学进行，以柱型苹果新品种“鲁加6号”（Malus domestica cv.Lujia 6）为试材，优化了初代培养条件，筛选了试管苗增殖培养基，研究了离体叶片再生条件和试管苗生根条件，建立了高频、稳定的叶片再生植株技术体系。主要取得了以下研究结果:
1、优化了柱型苹果“鲁加6号”的初代培养条件，获得了试管苗
研究表明，在外植体接种芽度过自然休眠后，早春芽体开始活动，但鳞片尚未展开时接种，可以有效降低污染，加入4g·L-1PVP可以有效防止褐化。“鲁加6号”苹果的增殖培养条件为:培养温度25±2℃，光强2000Lx，光照时间16h/d。基本培养基为MS培养基，最佳培养基激素配比分别为:6-BA1.0mg·L-1+NAA0.2mg·L-1。
2、获得了柱型苹果“鲁加6号”高频、稳定的叶片再生不定芽技术体系
通过研究基本培养基、激素种类及浓度配比、暗培养、接种方式及外植体苗龄对“鲁加6号”叶片再生不定芽的影响，建立了最佳叶片再生不定芽体系，即:培养基为MS+6-BA4.0mg·(1)-1+NAA0.1mg·L-1+蔗糖30g·L-1+琼脂7g·L-1。选择25-30d苗龄的叶色嫩绿、长势较强的叶片作为外植体可以显著提高再生频率。暗培养两周能明显提高叶片的再生的能力。叶片的正反面接种方式对叶片再生没有显著影响。采用最佳叶片再生体系，“鲁加6号”再生频率可达91.3％，单叶平均再生芽数达3.8个。
3、建立了柱型苹果“鲁加6号”高效生根体系
通过对影响生根的培养基种类、激素种类和浓度等因素的研究，建立了柱型苹果“鲁加6号”最佳生根培养基，即:1/2MS+IAA0.3mg·l-1+IBA1.0mg·l-1。试验结果表明，“鲁加6号”在1/2MS+IAA0.5mg·l-1培养基中，虽然生根数很多，生根频率很高，但侧根数较少，根的质量明显不如采用IAA和IBA组合处理。“鲁加6号”在1/2MS培养基中生根的数量和质量优于MS培养基和改良White培养基。用三种生长素IAA、NAA、IBA处理表明，IAA处理的试管苗基部直接生根，IBA和NAA处理的试管苗都是先生成愈伤组织，然后从愈伤组织上生出根来。正交试验结果表明，影响“鲁加6号”生根的主次因素为IAA＞IBA＞NAA。在最佳生根体系中，“鲁加6号”生根率可达100％，平均生根数达到8.9根。