【摘 要】
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目的:探讨松花粉（pollen pini,PP）水提液如何通过影响烯醇化酶1（enolase1,ENO1）基因的表达产物进而抑制磷脂酰肌醇3激酶/蛋白丝氨酸苏氨酸激酶（phosphatidylinositol-3-kinase/protein-serine-threonine kinase,PI3K/AKT）通路的过度激活,从而抑制肝癌细胞的增殖、侵袭和迁移。方法:⑴本研究首先对ENO1进行生信分
【基金项目】
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右江民族医学院校级重点课题（项目编号:yy2021sk012）;右江民族医学院高层次人才配套经费；
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目的:探讨松花粉（pollen pini,PP）水提液如何通过影响烯醇化酶1（enolase1,ENO1）基因的表达产物进而抑制磷脂酰肌醇3激酶/蛋白丝氨酸苏氨酸激酶（phosphatidylinositol-3-kinase/protein-serine-threonine kinase,PI3K/AKT）通路的过度激活,从而抑制肝癌细胞的增殖、侵袭和迁移。方法:⑴本研究首先对ENO1进行生信分析。⑵检测PP水提液中的主要成分。⑶分别做SMMC-7721细胞和过表达ENO1稳转株的细胞计数试剂盒8（cell counting kit 8,CCK8）实验、Transwell实验和蛋白质免疫印迹法（Western blot）实验、过表达ENO1稳转株的细胞划痕实验。⑷用ENO1抑制剂进行ENO1的增殖抑制实验。⑸建立过表达ENO1稳转株和空载转染细胞的裸鼠成瘤模型,取各组存活裸鼠的血清做丙氨酸氨基转氨酶（alanine aminotransferase,ALT）、天门冬氨酸氨基转移酶（aspartate aminotransferase,AST）和AST/ALT的检测,取各组成瘤存活裸鼠的瘤体称重并提蛋白做Western blot实验。结果:⑴肝细胞癌（hepatocellular carcinoma,HCC）中的ENO1与正常组织的相比磷酸化水平差异显著。⑵PP中主要抗癌成分总多糖、总黄酮含量和PP水提液锌离子浓度大都高于其他抗肿瘤药物。⑶PP水提液在体外抑制了SMMC-7721细胞、过表达ENO1稳转株和空载转染细胞的侵袭及增殖相关蛋白的表达。PP水提液对于过表达ENO1稳转株细胞迁移的抑制大于空载转染细胞。⑷ENO1抑制剂对过表达ENO1稳转株的存活率抑制显著。⑸PP水提液抑制了成瘤裸鼠血清ALT、AST、AST/ALT的升高并减低了瘤体重量;PP水提液在体内抑制了过表达ENO1瘤体的细胞增殖相关蛋白的表达;在PP水提液作用下,过表达ENO1瘤体的增殖相关蛋白表达都要高于空载瘤体。结论:⑴PP水提液可以抑制SMMC-7721细胞的增殖、侵袭和迁移。⑵PP水提液抑制肝癌细胞与抑制ENO1和PI3K/AKT通路有关。⑶PP水提液通过调节ENO1和MBP-1的表达,分别通过抑制C-MYC和Erb-B2受体酪氨酸激酶2（Erb-B2 Receptor Tyrosine Kinase 2,ERBB2）这两条途径抑制PI3K/AKT通路而实现对HCC的抑制。
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