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第一部分：针刺对胚胎着床障碍大鼠子宫内膜CXCL8及其受体的影响目的探讨针刺对胚胎着床障碍大鼠子宫内膜CCL2、CXCL8及其受体的影响。方法将72只孕鼠随机分为正常组(N)、模型组(M)、针刺组(A)、黄体酮(W),每组随机再分为第6天(D6)、第8天(D8)、第10天(D10)。其中M组、A组、W组妊娠Dl天米非司酮-麻油溶液造模,N组仅给予麻油溶液。同时A组固定并每天针刺三阴交、后三里,N组和M组仅固定,W组肌肉注射黄体酮,直至处死。统计孕鼠胚泡着床数,用免疫组织化学法,Western blot和Real-time PCR等方法测定着床点的子宫内膜CCL2、CXCL8及其受体的表达。结果1.与N组相比,M的平均胚胎数明显降低,差异有统计学意义(P<0.05)。与M组相比,A组和W组的平均着床胚胎数则均明显增加,差异显著(P<0.05)。2.免疫组织化学结果显示：与N组相比,M组大鼠妊娠D6、8、10天子宫内膜CCL2、CCR2、CXCL8、CXCR1蛋白的表达以及妊娠D8、10天子宫内膜CXCR2蛋白的表达均明显降低,差异显著(P<0.05)。与M组相比,A组大鼠妊娠D6、8、10天子宫内膜CCL2、CCR2蛋白的表达和妊娠D8、10天子宫内膜CXCL8、 CXCR1、CXCR2蛋白的表达均明显升高(P<0.05)；W组大鼠妊娠D6、8、10天子宫内膜CCL2、CCR2、CXCL8、CXCR1蛋白的表达和妊娠D8、10天子宫内膜CXCR2蛋白的表达均明显增加,差异显著(P<0.05)。3. Western blot结果显示：与N组相比,M组大鼠妊娠D6、8、10天子宫内膜CCL2、CCR2、CXCK8、CXCR1蛋白的表达以及妊娠D8、10天子宫内膜CXCR2蛋白的表达均明显降低,差异显著(P<0.05)。与M组相比,A组大鼠妊娠D6、8、10天子宫内膜CCL2蛋白的表达,妊娠D6、10天子宫内膜CCR2、CXCR1蛋白的表达以及妊娠D8、10天子宫内膜CXCL8、CXCR2蛋白的表达均明显升高(P<0.05)；W组大鼠妊娠D6、8、10天子宫内膜CCL2、CCR2、CXCR1蛋白的表达,妊娠D8、10天子宫内膜CXCL8. CXCR2蛋白的表达均明显增加,差异显著(P<0.05)。4. Real-time PCR结果显示：与N组相比,M组大鼠妊娠D6、8、10天子宫内膜CCL2、CCR2、CXCR1mRNA的表达以及妊娠D8、10天子宫内膜CXCL8、CXCR2mRNA的表达均明显降低,有显著差异(P<0.05)。与M组相比,A组大鼠妊娠D8天子宫内膜CCL2、CXCL8、GXCR1、CXCR2mRNA的表达和妊娠D6、8天子宫内膜CCR2mRNA的表达均明显升高(P<0.05)；W组大鼠妊娠D8、10天子宫内膜CCL2、CXCL8mRNA的表达,妊娠D6、8天子宫内膜CCR2mRNA的表达以及妊娠D8天子宫内膜CXCR1、CXCR2mRNA的表达均明显增加,差异显著(P<0.05)。结论针刺能够提高着床障碍大鼠的着床胚胎数,其机制与针刺上调胚泡着床障碍大鼠母胎界面CCL2、CCR2、CXCL8、CXCR1和CXCR2的表达有关。第二部分：针刺对胚胎着床障碍大鼠uNK细胞、γδT细胞、Treg细胞的影响目的探讨针刺对胚胎着床障碍大鼠uNK细胞、γδT细胞、Treg细胞的影响。方法将144只孕鼠随机分为正常组(N)、模型组(M)、针刺组(A)、黄体酮组(W),每组随机再分为D6组、D8组、D10组。其中M组、A组和W组妊娠D1天用米非司酮-麻油溶液造模,N组仅给予麻油溶液。同时A组固定每天行针刺三阴交、后三里,N组和M组仅固定,W组肌肉注射黄体酮,直至处死。统计孕鼠的胚泡着床数,用流式细胞术检测外周血γδT细胞、CD4+CD25+Foxp3+Treg细胞和子宫内膜CD3-CD161+NK细胞、γδT细胞、CD4+Foxp3+Treg细胞的比例,Western blot和Real-time PCR测定着床点的子宫内膜Foxp3的表达。结果1.M组的平均着床胚胎数明显低于N组,有显著差异(P<0.05)。与M组相比,A组和W组的平均着床胚胎数则显著增加(P<0.05)。2.与N组相比,M组大鼠妊娠D6、8、10天外周血CD3+γδTCR+细胞、CD4+CD25+Foxp3+Treg细胞的比例明显降低,有显著差异(P<0.05)。与M组相比,A组大鼠妊娠D6、8天外周血CD3+yγδTCR+细胞的比例和妊娠D6、8、10天外周血CD4+CD25+Foxp3+Treg细胞的比例均明显升高；W组大鼠妊娠D6、8、10天外周血CD3+y8TCR+细胞、CD4+CD25+Foxp3+Treg细胞的比例也明显升高,差异显著(P<0.05)。3.与N组相比,M组大鼠妊娠D6、8、10天子宫内膜CD3-CD161+NK细胞、CD3+γδTCR+细胞、CD4+Foxp3+Treg细胞的比例明显降低,有显著差异(P<0.05)。与M组相比,A组大鼠妊娠D6、8天子宫内膜CD3-CD161+NK细胞、CD3+y8TCR+细胞的比例和妊娠D8、10天子宫内膜CD4+Foxp3+Treg细胞的比例均明显升高；W组大鼠妊娠D6、8、10天子宫内膜CD3-CD161+NK细胞、CD4+Foxp3+Treg细胞和妊娠D6、8天子宫内膜CD3+y8TCR+细胞的比例均明显升高,差异显著(P<0.05)。4.与N组相比,M组大鼠妊娠D6、8、10天Foxp3蛋白的表达明显下降(P<0.05)。与M组相比,A组大鼠妊娠D6、8天子宫内膜Foxp3蛋白的表达明显增高；W组大鼠妊娠D6、8、10天子宫内膜Foxp3蛋白的表达也明显增高(P<0.05)。5.与N组相比,M组大鼠妊娠D6、8、10天Foxp3mRNA的表达明显下降(P<0.05)。与M组相比,A组大鼠妊娠D6、10天子宫内膜Foxp3mRNA的表达明显增高；W组大鼠妊娠D6、8天子宫内膜Foxp3mRNA的表达也明显增高(P<0.05)。结论针刺不仅能够上调胚胎着床障碍大鼠外周血γδT细胞、CD4+CD25+Foxp3+Treg细胞的比例,而且还能上调大鼠子宫内膜局部CD3-CD161+NK细胞、γ8T细胞、CD4+Foxp3+Treg细胞的比例,表明针刺可能通过调节免疫细胞促进胚胎的着床和胎盘的形成。