目的:　　何首乌饮片在临床上作用确切，但是对于其多糖的研究报道较少，其化学研究和生物活性研究还不深入，不利于发挥何首乌多糖的最佳功效，药性重复性差，质量难控制，制约了其多糖制剂的开发利用。　　方法:　　本专题进行了以下几项实验研究，为何首乌的进一步开发利用提供科学依据：　　1.何首乌多糖的提取、纯化与分离及含量测定：实验采用水提醇沉的方法提取何首乌粗多糖，计算得率。通常粗多糖里仍含有大量小分子色素物质和植物蛋白，实验在文献研究和预试验基础上，对何首乌粗多糖采用鞣酸法去蛋白、H2O2脱色，通过单因素多水平研究方法优化何首乌粗多糖的纯化工艺。并采用乙醇分步沉淀法对何首乌多糖进行分离。采用蒽酮-硫酸法测定纯化分离后的何首乌多糖含量。　　2.凝胶色谱法测定多糖的分子量及分子量分布：运用凝胶色谱法对何首乌多糖各组分样品的分子量及分子量分布进行测定，根据GPC的校正曲线及样品的保留时间，采用GPC软件计算样品各组分的重均分子量(Mw)和数均分子量(Mn)。（本部分实验由广州分析测试中心协助完成）。　　3.薄层色谱法鉴定何首乌多糖的单糖组成：将生首乌多糖原料精制，乙醇分布沉淀法分离纯化得到的4个主要组分（S40、S60、S70、S80），经酸水解后用薄层色谱法（TLC）分析单糖组成。采用2次展开技术分离单糖，通过比较确定最佳展层及显色条件分别为展开剂(a)正丁醇：乙酸乙酯：异丙醇：乙酸：吡啶：水(7：20：12：7：6：5)，展开剂(b)正丁醇：吡啶：水(5：2：3)；使用苯胺-邻苯二甲酸显色剂进行显色。　　4.体外药效学实验：采用新鲜的脐血标本，分离脐血有核细胞（NC），用IMDM悬浮细胞并调整细胞浓度，加入过滤除菌的不同浓度的何首乌多糖分离组分，用甲基纤维素半固体法培养脐血集落形成单位。于14天后计数粒单系细胞集落形成单位（CFU-GM），观察其增殖情况。考察不同浓度的何首乌多糖溶液对脐血中有增殖潜能的造血干/祖细胞的刺激作用的差异，为论证何首乌多糖的补血活性提供客观依据。　　结果:　　何首乌粗多糖的纯化工艺：①鞣酸法去蛋白的最佳条件是：多糖与鞣酸的质量比为1：1，搅拌均匀后静置过夜，待沉淀完全，混合液以3000r/min离心5min。②H2 O2脱色的最佳条件：取适量多糖溶解后，用5% NaOH溶液调pH=8.0，H2 O2用量与多糖溶液比为3：1，搅拌均匀，50℃水浴中恒温4 h。采用蒽酮-硫酸法测定何首乌多糖含量，通过计算得出：何首乌粗多糖经过脱蛋白、脱色的处理后，糖含量逐渐提高。鞣酸法除蛋白和Sevag法除蛋白后的多糖的糖含量基本一致，进一步表明两种方法去蛋白能力相当。　　运用凝胶色谱法对S40、S60、S70、S80何首乌多糖组分样品的分子量及分子量分布进行测定。其中S40组分的重均分子量为139980，数均分子量29218；S60组分的重均分子量为52294，数均分子量为10423；S70组分的重均分子量为51334，数均分子量为11299；S80组分的重均分子量为66229，数均分子量为14435。　　薄层色谱法分析何首乌多糖的单糖组成结果：分离的何首乌多糖组分的单糖组成主要是D-葡萄糖。　　采用乙醇分步沉淀法分离多糖，得到S40、S60、S70、S80共4个组分的何首乌多糖。采用脐血造血祖细胞体外培养的实验血液学技术，研究何首乌多糖对人粒单系造血祖细胞集落克隆（CFU-GM）增殖分化的影响。实验数据经统计分析，得出 S40与S80多糖组分有较强的补血活性。　　结论:　　本实验研究初步明确了何首乌多糖为何首乌饮片补血活性的物质基础，阐述了祖国传统医学“补血”理论的现代生物学机制，为何首乌的进一步开发利用提供科学依据。