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背景铜绿假单胞菌是一种条件致病菌,具有强大的耐药基因和克隆传播能力,是引起住院患者感染肺炎的主要院内致病菌。近年来,铜绿假单胞菌引起的感染发生率升高,病情多危重,治疗困难,病死率高,然而铜绿假单胞菌对多种抗生素的耐药性也普遍升高,因此探索铜绿假单胞菌的耐药机制、加强对铜绿假单胞菌的耐药性监测对治疗铜绿假单胞菌肺炎有重要意义。现代医学的治疗以改善铜绿假单胞菌肺炎的症状为主,广谱抗生素应用广泛,这也因此导致铜绿假单胞菌对多种抗生素耐药。祖国医学在防治铜绿假单胞菌肺炎方面有其独特的优势,且取得显著的临床疗效,不仅能有效改善患者临床症状,还能提高免疫力,提高生活质量,延缓生存时间。因此,有必要深入探索中药治疗铜绿假单胞菌肺炎的作用机制。目的观察扶正解毒化瘀方对MDRPA所致慢性肺炎大鼠血常规中相关炎性指标、肺组织病理和一般情况并进行疗效评价,基于IL-36/NFκB探索扶正解毒化瘀方治疗MDRPA慢性肺炎的作用机制。方法将120只大鼠随机分为5组(空白组、模型组、中药组、西药组和中西药组)适应性喂养一周,以经口腔气管插管方法建立MDRPA慢性肺炎大鼠模型,造模结束后每日给药两次。中药组予扶正解毒化瘀颗粒剂原液2ml/200g灌胃,西药组予注射用哌拉西林钠他唑巴坦钠溶液0.36ml/200g腹腔注射,中西药组分别予扶正解毒化瘀颗粒剂原液灌胃和注射用哌拉西林钠他唑巴坦钠溶液腹腔注射,空白组和模型组每天予等量无菌水灌胃,大鼠自由进食和饮水。造模后观察大鼠一般情况,分别于造模后3天、7天、14天和21天后处死大鼠,腹主动脉取血测定血常规,血清用于酶联免疫吸附测定法。留取大鼠肺组织,对肺组织进行HE染色,光镜下分析肺组织损伤程度,肺匀浆用于细菌培养,取右肺上叶进行蛋白质印迹法检测NFκB亚基P65蛋白的表达。结果实验一:MDRPA慢性肺炎大鼠模型经肺组织病理观察、肺匀浆活菌计数表明造模成功,血常规炎性指标结果提示扶正解毒化瘀方可以一定程度减轻模型大鼠炎症反应,从一般情况观察,中药组大鼠症状和体征改善明显。综合来看,扶正解毒化瘀方对改善大鼠慢性肺炎一般情况起着治疗作用。实验二:在细胞因子水平,与空白组相比,模型组TNF-α升高明显,有显著性差异(P<0.05);与模型组相比,中药组TNF-α在造模7、14、21天组有显著性差异(P<0.05),西药组在造模7、21天组有显著性差异(P<0.05),中西药组在造模14、21天组有显著性差异(P<0.05)。与空白组相比,模型组IL-36升高明显,在造模3、21天组有显著性差异(P<0.05);与模型组相比,中药组在造模7、14、21天组有显著性差异(P<0.01),西药组IL-36在造模3、7天组有显著性差异(P<0.01),中西药组IL-36在造模3、21天组有显著性差异(P<0.05)。与空白组相比,模型组IL-6升高明显,在造模3、21天组有显著性差异(P<0.05);与模型组相比,中药组IL-6在造模7、14、21天组有显著性差异(P<0.05),西药组在造模3、7天组有显著性差异(P<0.05)。与空白组相比,中药组IL-10在造模3、14、21天组升高明显,有显著性差异(P<0.05),西药组在造模14、21组天升高明显,有显著性差异(P<0.05);与模型组相比,中药组、西药组IL-10在造模14天组升高明显,有显著性差异(P<0.05)。相关性分析结果表明,IL-36与TNF-α在3、7、21天组表现出统计学差异,IL-36与IL-6在7、21天组表现出统计学差异。考虑扶正解毒化瘀方可能通过抑制NF-κB转录因子,减少促炎细胞因子IL-36、TNF-α和IL-6的产生,上调抗炎细胞因子IL-10的表达,进而减少炎性渗出造成的肺部损伤。在蛋白表达水平,相比空白组,模型组NF-κB亚基P65升高明显,有显著性差异(P<0.05),西药组在造模3、21天组升高明显,有显著性差异(P<0.05),中药组、中西药组在造模3天组升高明显,有显著性差异(P<0.01);与模型组相比,其中中药组NF-κB亚基P65在造模3、21天组升高明显,有显著性差异(P<0.05)。考虑扶正解毒化瘀方可能通过抑制NF-κB转录因子,降低NF-κB亚基P65的表达,降低了炎性细胞因子的活性表达,最终对大鼠肺组织起到了保护作用。结论1.扶正解毒化瘀方对模型大鼠一般状况、肺组织光镜病理产生积极治疗作用,能够减轻肺部炎症程度;2.扶正解毒化瘀方可能通过抑制IL-36/NFκB,影响P65蛋白和炎性细胞因子的表达,发挥对MDRPA慢性肺炎的治疗作用。