论文部分内容阅读
水飞蓟素（silymarin，SM）是从水飞蓟（Silybum marianum（L．）Gaertner．）果实中提取分离得到的黄酮类有效成分，由水飞蓟宾（silybin）、水飞蓟宁（silidianim）、水飞蓟丁（siliehristim）和水飞蓟醇（silibonol）四种同分异构体组成，其中水飞蓟宾为主要成分，临床上主要用于治疗急慢性肝炎、各种肝损伤、肝纤维化和早期肝硬化等，具有疗效好、副作用小等特点。但由于其难溶于水、胃肠道不稳定性及小肠吸收慢，导致口服生物利用度低。为提高水飞蓟素的溶出速度，改善其生物利用度，并增大载药量以制成适合工业化生产的新剂型，本文设计和研制了水飞蓟素自微乳化胶囊和水飞蓟素磷脂复合物自微乳化胶囊，并采用体内外不同方法对其进行了科学的评价。课题根据不同研究的要求，建立了紫外分光光度法及高效液相色谱法，用于水飞蓟素及水飞蓟素磷脂复合物中活性总黄酮或水飞蓟宾的处方筛选、含量测定及体内评价，为SMEDDS的质量研究奠定了坚实的基础。上述方法灵敏度高，专属性强，准确度好，满足本研究中的各项分析要求。通过预实验选出溶解药物能力及乳化性能较好的辅料，设计四因素三水平正交实验，以外观、加水情况及粒径为指标，确定使用Cremophor EL为乳化剂，Transcutol为助乳化剂，通过绘制伪三元相图，选择微乳区最大的处方，进一步确定了油相组成（油酸乙酯／MCT=1／1）。最终通过综合评价饱和溶解度、自乳化效率以及成乳后的稳定性，确定了SM-SMEDDS的处方为混合油（油酸乙酯：MCT=1：1）200g，Cremophor EL 225g，Transcutol75g，水飞蓟素28g。每个剂量含水飞蓟素28mg，总重约0.5g。分别用反向透析法和样品分离法考察了水飞蓟素自微乳化胶囊的体外释药特征，结果两种溶出方法均表明自制制剂溶出最快，与利加隆胶囊的溶出无显著性差异，但显著高于益肝灵片剂。该制剂成乳后平均粒径为120nm，ζ电位为-15.2mv，平均含量101％。胶囊内容物影响因素试验表明，该自微乳液应避光保存，恒温加速实验结果显示，该制剂稳定性良好。选择丙酮为反应溶剂，正己烷为收集溶剂，以水飞蓟素、大豆磷脂质量比为1：1，制备了水飞蓟素磷脂复合物，结果产率约为65％，复合率可高达97％。分别以DSC及瓜分析法鉴别了磷脂复合物的形成，结果显示二者之间未形成新的化学基团。在水飞蓟素自微乳液研究结果的基础上，通过绘制假三元相图，结合处方中各辅料的溶解能力、自乳化速率及成乳后的稳定性，筛选出水飞蓟素磷脂复合物自微乳化液的处方最终为水飞蓟素磷脂复合物70g，混合油（油酸乙酯：MCT为1：1）250g，Cremophor EL 200g，Transcutol 50g，其中每粒胶囊含水飞蓟素70mg。该制剂成乳后平均粒径为146nm，以水为稀释介质测得其ζ电位为-29.5mv。体外释放实验结果复合物自微乳化胶囊较原料药自微乳化液释放缓慢。稳定性实验研究证明，自制复合物自微乳化胶囊稳定性良好。比较了自制水飞蓟素自微乳化胶囊、水飞蓟素磷脂复合物自微乳化胶囊和市售利加隆胶囊三种制剂在家犬体内的差异性，采用三周期三交叉给药，进行了体内药动学研究。结果对比于市售制剂，自制两种制剂相对生物利用度分别为（157.0±53.9）％和（250.9±58.3）％。方差分析结果表明AUC0-∞和Cmax个体间、周期间无显著性差异，制剂间存在显著性差异；双单侧t检验表明，三制剂间两两均生物不等效。可见，水飞蓟素及其磷脂复合物自微乳化胶囊在体内吸收迅速，生物利用度均显著提高。