两株海洋放线菌次级代谢产物的研究

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本文从烟台附近潮间带的海泥样品中分离到海洋放线菌393株,并对其次生代谢产物进行了生物活性筛选。发现具有选择性抗菌活性的菌株占44.87%,具有选择性细胞毒活性的菌株占30.27%,显示了海洋放线菌在筛选活性药物方面的巨大潜力。  综合考察各菌株的抗菌活性和细胞毒活性结果,选取了2株放线菌28和223作为本研究的目的菌株。利用六种培养基,两种 pH和两种培养温度共计24个培养条件对2株菌进行了培养条件优化,通过生物活性筛选确定了优化范围内2株菌的最佳培养条件,分别为28-OM-II和223-19-IV。  分别按其最佳培养条件进行18 L发酵。综合利用正相、反相硅胶、Sephadex LH-20、TLC、PTLC、中低压液相色谱、HPLC等各种色谱技术,共分离出16个化合物。综合波谱分析(1D、2D NMR和MS)方法鉴定了化合物的结构,包括1个新颖结构化合物:6S-6-hydroxymethyl-7-hydroxyl-8-methoxy-9-methyl-tetrahydroisoquinoline[2,3-f]pyraz ine-3-methyl-4-one(1)以及13个已知化合物:(3S)-1,4-二甲基-3-(1-异丙基)-2,5-二酮哌嗪(2),环-(L-脯-L-苯丙)二肽(3),环-(L-脯-L-酪)二肽(4),环-(L-4-OH-脯氨酸-L-亮)二肽(5),环-(L-苯丙-甘)二肽(6),环-(L-4-OH-脯-L-苯丙)二肽(7),环-(L-脯-L-缬)二肽(8),N-(2-苯乙基)乙酰胺(9),3-甲基-4-羟基-6-(1-异丙基)-2H-吡喃-2-酮(10),3-乙基-4-羟基-6-(1-异丙基)-2H-吡喃-2-酮(11),3-乙基-4-羟基-6-(1-甲丙基)-2H-吡喃-2-酮(12),14-甲基十五烷酸(13),(8E)-二十二烯酸甘油酯(14),值得一提的是(2)作为一种天然产物为首次从海洋微生物中分离到。  对分离的单体化合物进行活性评价,其中新化合物1具有一定的选择性细胞毒活性,在10-4 mol/L和10-5 mol/L浓度下,对Hela细胞的抑制作用较其他肿瘤细胞最明显,抑制率分别为61.21%和53.93%;化合物2具有明显的抑制肿瘤细胞生长作用,在10-4 mol/L和10-5 mol/L浓度下对子宫颈癌细胞 Hela细胞的抑制率分别为60.58%和41.56%。
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