丹栀逍遥散对PCO大鼠卵巢颗粒细胞TGR-aR、EGFR蛋白表达的影响

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目的利用脱氢表雄酮诱导建立多囊卵巢大鼠模型,观察丹栀逍遥散对多囊卵巢大鼠卵巢颗粒细胞转化生长因子-a受体(TGF-a R)及表皮生长因子受体(EGFR)蛋白表达的影响并浅谈其作用机理。方法选用21d龄断乳未成年SPF级雌性SD大鼠60只,随机分为空白组和模型组,模型组行颈背部皮下注射脱氢表雄酮诱导建立多囊卵巢大鼠模型,空白组颈背部皮下注射等量大豆油剂,共21天。判定造模成功后,将模型组大鼠完全随机分为:模型对照组、丹栀逍遥组、达英35组,加上空白对照组,共4组。丹栀逍遥组和达英-35组分别予以丹栀逍遥散药液、达英-35药液灌胃,空白对照组及模型对照组灌服等量蒸馏水,各组大鼠每天称取当日体重计算灌胃量。连续灌胃21d,停药7d,28d为一个疗程,共给药3个疗程。实验结束后观察卵巢形态学变化;放射免疫法测定血清性激素T、LH、FSH水平值;免疫组化法检测TGF-a R、EGFR蛋白表达情况。结果(1)PCO大鼠模型评价:造模后,模型组大鼠体重和血清T水平值均显著高于空白对照组(P<0.01),E2水平则低于空白对照组(P<0.01);模型组大鼠动情周期失去规律性变化,多处于动情间期,提示无排卵;光镜下见模型组大鼠卵巢呈囊状扩张样改变。(2)药物干预后,PCO大鼠血清性激素(T、FSH、LH)水平变化:与空白对照组比较,模型对照组T水平显著升高(P<0.01);与模型对照组比较,丹栀逍遥散组、达英-35组T水平明显下降(P<0.01);各组大鼠血清FSH、LH水平值对比均无显著差异(P>0.05)。(3)药物干预后,PCO大鼠卵巢颗粒细胞TGF-a R、EGFR蛋白表达情况:与空白对照组比较,模型对照组TGF-a R、EGFR蛋白表达显著升高(P<0.01);丹栀逍遥散组、达英-35组TGF-a R、EGFR蛋白表达明显低于模型对照组(P<0.01)。(4)药物干预后,各组大鼠卵巢组织形态学变化:空白对照组卵巢内可见窦状卵泡发育及成熟卵泡,少量可见排卵征;模型组大鼠卵巢包膜增厚,见多个小卵泡和闭锁卵泡及囊状扩张卵泡,未见成熟卵泡或排卵征;丹栀逍遥组、达英-35组大鼠卵巢囊状卵泡及闭锁卵泡显著减少,内可见窦状卵泡;丹栀逍遥组部分可见成熟卵泡或排卵征。结论丹栀逍遥散可显著降低PCO大鼠血清T水平值,减少卵巢TGF-a R、EGFR蛋白阳性表达,改善PCO大鼠卵巢功能,促进卵泡正常生长发育,整体改善卵巢多囊样变和排卵障碍,提示丹栀逍遥散治疗多囊卵巢综合征可能与其降低雄激素水平,调节卵巢颗粒细胞TGF-a R、EGFR蛋白表达有关。
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