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研究背景:高级糖基化终末产物（AGEs）是糖尿病的重要致病物质,并且在阿尔茨海默病（AD）的发生和发展中也起着重要的推进作用。它可以促进微管相关蛋白Tau蛋白的过度磷酸化和β-淀粉样蛋白（Aβ）的沉积。而糖尿病中另一致病因子巨噬细胞迁移抑制因子（MIF）也被发现相对于同龄正常患者在AD患者和轻度认识障碍（MCI）患者的脑脊液中会显著增高。MIF的缺失也可以减弱Tau蛋白的过度磷酸化。研究目的:1.AGEs对MIF的影响研究及分子机制研究。2.MIF抑制剂ISO-1在AGEs进一步损伤AD细胞模型的保护作用研究。研究方法:1.体外培养PC12细胞,用AGEs处理PC12细胞,实时荧光定量PCR（qRT-PCR）及免疫印迹法（Western Blot,WB）检测细胞中MIF的mRNA和蛋白表达,设空白对照组和BSA对照组。2.体外培养PC12细胞,AGEs处理PC12细胞,分别加入?基因结合核因子（nuclear factor-k-gene binding,NF-?B）抑制剂、丝裂原活化蛋白激酶（mitogen-activated protein kinase,MAPK）抑制剂、磷脂酰肌醇3激酶（phosphoinositide 3 kinase,PI3K）抑制剂、磷脂酶C（phospholipase C,PLC）抑制剂、高级糖基化终末产物受体（the receptor of advanced glycation endproducts,RAGE）抑制剂,qRT-PCR法检测细胞中MIF的mRNA表达,设空白对照组和AEGs对照组。3.MTT法筛选Aβ1-40的最适浓度和最佳给药时间,建立AD细胞模型。CCK-8法筛选AGEs最适浓度。AGEs和ISO-1作用于Aβ1-40诱导的PC12细胞,倒置显微镜下观察细胞数目和形态,qRT-PCR法检测白介素1β（interleukin 1beta,IL-1β）、白介素6（interleukin 6,IL-6）、肿瘤坏死因子α（tumor necrosis factor-alpha,TNF-α）的mRNA表达。研究结果:1.BSA作为对照组和空白对照组并没有显著差异。而与空白对照组相比,AGEs浓度200μg/ml、300μg/ml两组具有统计学差异（P<0.05）,MIF mRNA表达有明显升高。AGEs浓度100μg/ml、300μg/ml两组具有统计学差异（P<0.05）,MIF蛋白表达有明显升高。2.与AEGs对照组相比较,加入NF-kB抑制剂、MAPK抑制剂、RAGE抑制剂、PLC抑制剂后MIF的mRNA表达分别有不同程度下降（P<0.05）。3.倒置显微镜100×下可见正常对照组PC12细胞树突多而长,紧贴瓶底,细胞密集,结构清晰且核仁可见,细胞增殖快。与对照组相比Aβ1-40造模组细胞增殖受到抑制,细胞数减少,细胞间连接松弛且部分树突缩回,核仁部分可见。经过AGEs处理细胞后,细胞增殖进一步受到抑制,大量细胞浮起变圆,细胞碎片较多。贴壁细胞失去正常神经细胞特征。而先经过ISO-1预处理后可见细胞增殖的抑制作用显著减弱,细胞数目增多,漂浮细胞减少且贴壁细胞形态良好,细胞间连接增多,树突变长变多。AGEs促进了Aβ1-40诱导的PC12细胞构建的AD模型细胞的损伤和凋亡以及炎症介质IL-1β、IL-6和TNF-α的表达,AGEs和ISO-1共同作用可明显提高AD细胞模型的细胞生存率、下调炎症介质的表达水平（P<0.05）。研究结论:1.AGEs促进细胞模型MIF的表达。2.AGEs促进MIF表达的分子学机制可能是通过NF-kB信号通路、MAPK信号通路、PI3K信号通路、PLC信号通路来实现的。3.ISO-1降低了AGEs对AD细胞模型的损伤作用,其机制可能是AGEs介导MIF表达促进AD细胞模型的神经炎症,而ISO-1降低了其神经炎症介质的表达。