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目的：吗啡是一种临床应用广泛的镇痛药物，能有效的缓解术后及晚期癌痛患者的疼痛。但是，吗啡在镇痛的同时也能产生显著的依赖性，以强迫用药、不断增加药物摄入量和停药时出现戒断综合征为主要特征。成瘾者即使完成脱毒治疗以后，仍有90%以上的吸毒者复吸，复吸机制是目前成瘾研究的重点和难点。值得注意的是，吗啡戒断过程中会产生多种负性情绪症状，比如抑郁、躁狂和焦虑等，被认为是导致成瘾者复吸的主要因素。目前研究认为，中枢非阿片受体系统可能是成瘾防治的重要靶点，并且体内存在多种“内源性抗阿片肽”调控阿片依赖时机体内环境的平衡。胆囊收缩素（cholecystokinin，CCK）是一类广泛分布于神经系统的脑肠肽，以神经递质和（或）神经调质的形式参与机体多种功能的调控。其中，八肽胆囊收缩素（cholecystokinin-octopeptide, CCK-8）在中枢神经系统的含量最为丰富，是目前已知的作用最强的内源性抗阿片肽。本室以往研究发现，侧脑室给予外源性CCK-8慢性干预，可以明显减轻吗啡依赖大鼠的戒断症状；并且CCK-8能显著抑制慢性吗啡依赖纳洛酮催促戒断诱导的条件性位置厌恶（conditioned place aversion, CPA）的形成。但是，CCK-8是否可以通过缓解吗啡戒断过程中的焦虑样行为达到促进“脱毒”、防止复吸作用尚不明确。高架十字迷宫（elevated plus-maze, EPM）是目前广泛应用于啮齿类动物焦虑样行为研究的实验模型。本研究应用剂量递增法建立吗啡依赖模型后进行自发戒断，采用EPM观察外源性CCK-8对大鼠吗啡自发戒断过程中焦虑样行为的作用，并阐明CCK-8作用的受体机制及其与内源性阿片系统在吗啡戒断大鼠焦虑样行为中的相互作用关系，为CCK-8在戒毒方面的应用提供相关的实验依据。方法：1吗啡急性干预对大鼠焦虑样行为的影响：给予大鼠不同剂量的吗啡（1、5、10mg/kg，i.p.）急性干预后，采用EPM观察大鼠焦虑样行为的变化，以EPM开臂停留时间百分比和进入次数百分比反映大鼠的焦虑状态。2CCK-8急性干预对大鼠焦虑样行为的影响：给予大鼠不同剂量CCK-8（0.01、0.1、1g，i.c.v.）急性干预后，采用EPM观察大鼠焦虑样行为的变化，以EPM开臂停留时间百分比和进入次数百分比反映大鼠的焦虑状态。3吗啡自发戒断过程中大鼠焦虑样行为的变化：连续剂量递增法（10、20、30、40、50mg/kg，i.p.，Bid）注射吗啡5天建立慢性吗啡依赖模型，第6~12天给予生理盐水（1mL/kg）腹腔注射进行自发戒断，采用EPM观察慢性吗啡依赖大鼠在自发戒断过程中不同时间点（day1、3、5、7）焦虑样行为的变化。4CCK-8对吗啡自发戒断大鼠焦虑样行为的影响：我们选择焦虑样行为最为严重的一天给予不同剂量外源性CCK-8（0.01、0.1、1g）侧脑室注射，观察外源性CCK-8对吗啡戒断大鼠焦虑行为的影响。5CCK-8抑制吗啡自发戒断大鼠焦虑样行为的受体机制：在侧脑室注射CCK-8前分别应用CCK1及CCK2受体特异性拮抗剂L-364，718（10μg）和L-365,260（10μg）干预，以明确CCK-8抑制吗啡戒断大鼠焦虑样行为的受体机制。6CCK-8和内源性阿片肽系统在吗啡自发戒断大鼠焦虑样行为中的相互作用关系：在给予CCK-8前应用高选择性阿片受体拮抗剂（CTAP）干预，以探讨CCK-8与内源性阿片系统在吗啡戒断大鼠焦虑样行为的相互作用关系。所得结果用均数±标准误（mean±SEM）表示，采用SPSS16.0统计分析软件进行统计学分析，各组数据行单因素方差分析（one-wayANOVA），组间比较用Bonferroni进行检验，以P<0.05为有统计学差异。结果：1EPM测试前2h给予吗啡（1、5mg/kg，i.p.）急性干预，可显著提高大鼠开臂停留时间百分比和进入次数百分比；而10mg/kg吗啡急性干预在降低大鼠开臂停留时间百分比和进入次数百分比的同时，对大鼠的活动性亦有明显的抑制作用。2EPM测试前15min给予不同剂量CCK-8（0.01、0.1、1g，i.c.v.）急性干预后，大鼠开臂停留时间百分比和进入次数百分比显著降低，但无明显的量效关系。同时，CCK-8急性干预对大鼠活动性无明显作用。3慢性吗啡依赖大鼠在自发戒断过程表现出明显的焦虑样行为，并且在戒断后第5天焦虑样症状最为严重。4在自发戒断第5天进行EPM测试前，给予外源性CCK-8（0.01、0.1、1g，i.c.v.）干预，可剂量依赖性地抑制吗啡自发戒断过程诱导的焦虑样行为，使开臂停留时间百分比和进入次数百分比明显增加。5同时给予外源性CCK-8（1g，i.c.v.）和CCK1受体拮抗剂L-364，718（10μg, i.c.v.）可显著阻断CCK-8对吗啡自发戒断大鼠焦虑样行为的抑制作用，而同时给予CCK-8和CCK2受体拮抗剂L-365，260（10μg,i.c.v.）则无法阻断外源性CCK-8的作用。6在自发戒断第5天进行EPM测试前，单次给予吗啡（5mg/kg, i.p.）处理可明显抑制大鼠焦虑样行为，与CCK-8的作用一致。同时给予外源性CCK-8（1g，i.c.v.）和高选择性阿片受体拮抗剂CTAP（10μg, i.c.v.）可显著阻断外源性CCK-8对吗啡自发戒断大鼠焦虑样行为的抑制作用，而CTAP本身对其无明显影响。结果提示，CCK-8可通过上调内源性阿片肽系统发挥其抗焦虑样作用。结论：吗啡急性干预具有明显的抗焦虑作用，而CCK-8则具有致焦虑作用。但是，外源性CCK-8对吗啡自发戒断大鼠已产生的焦虑样行为具有明显的抑制作用，该作用可通过CCK1受体上调内源性阿片肽完成。