小菜蛾肠道菌群对宿主生长发育的影响

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小菜蛾[Plutella xylostella L.(Lepidoptera:Plutellidae)]是危害十字花科蔬菜的世界性害虫,本研究通过饲喂抗生素改变小菜蛾肠道菌群,并进一步探索肠道菌群变化对小菜蛾生长发育和繁殖的影响。首先,通过抗生素药敏实验找出合适的抗生素,并通过体外实验获得该抗生素的最低抑菌浓度。其次,以最低抑菌浓度的抗生素溶液浸泡小白菜叶片喂食小菜蛾,当其发育到4龄时检测肠道菌群变化情况。同时,以同样的处理方法探索肠道菌对小菜蛾的生长发育和繁殖的影响。本文的研究结果如下:1.适合改变小菜蛾肠道菌的抗生素筛选及其浓度的确定选择各个类别的常规药敏实验抗生素24种进行抗生素筛选,通过抑菌圈大小比较结果:小菜蛾肠道菌对环丙沙星最敏感,抑菌圈直径39.4±0.5mm,大于其敏感阀值21mm,判断其为敏感。微量肉汤法测定环丙沙星对小菜蛾肠道菌的最低抑菌浓度(MIC)为1μg/ml。2.传统方法和PCR-DGGE结合检测小菜蛾肠道菌群变化1μg/ml的环丙沙星浸泡小白菜叶片,晾干后喂食小菜蛾,直到4龄解剖取其肠道,对照采用0.1%triton溶剂。采用传统培养和PCR-DGGE相结合的方法检测小菜蛾肠道菌变化情况。传统培养结果表明:对照组中肠杆菌属(Enterobacter)和肠球菌属(Enterococcus)检出率为100%,检出量最大,均达到108cfu/moth,为常驻的优势菌群;处理组中肠球菌属检出率为100%,检出量最大,达到105cfu/moth,但与对照组比较明显减少。PCR-DGGE结果表明:对照组的优势菌属于厚壁菌门(Firmicutes)的肠球菌属和变形菌门(Proteobacteria)的柠檬酸杆菌属(Citrobacter),还包含其他类型的细菌,主要有克雷伯氏菌属(Klebsiella)、拟甲色球藻菌属(Chroococcidiopsis)、泛菌属(Pantoea);处理组的优势菌为蓝藻菌门(Cyanobacteria)的拟甲色球藻菌属以及另外一种新细菌类型B,也检测到少量肠球菌。说明环丙沙星处理对小菜蛾肠道菌群有显著影响,能够有效清除肠杆菌科(Enterobacteriaceae)细菌。3.小菜蛾肠道菌群变化对其生长发育和繁殖的影响喂食环丙沙星以后,小菜蛾的肠道菌群影响生长发育及种群繁殖参数。本实验的结果表明:肠道菌的变化使得处理组小菜蛾幼虫和蛹的发育历期明显延长,蛹重显著增加;雌虫产卵量和成虫寿命均没有显著性差异;种群参数中净生殖率(R0)、内禀增长率(r)、周限增长率(λ)均没有显著性差异,处理组的平均世代周期(T)延长了。综上所述:环丙沙星主要改变小菜蛾肠道中变形菌门的肠杆菌科以及厚壁菌门的乳杆菌科(Lactobac illaceae)细菌。这样的肠道菌群结构变化会影响小菜蛾生长发育,但对种群增长没有影响。
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