【摘 要】
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micro RNAs是由21–23个核苷酸组成的高度保守的非编码RNA,它通过与特定m RNA的未翻译区结合负调节靶基因表达,研究表明microRNA异常表达与肿瘤的发生发展密切相关。类泛素修
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micro RNAs是由21–23个核苷酸组成的高度保守的非编码RNA,它通过与特定m RNA的未翻译区结合负调节靶基因表达,研究表明microRNA异常表达与肿瘤的发生发展密切相关。类泛素修饰是人类体内的重要生理过程,是人类的生理和病理反应所必须的生理反应。类泛素化蛋白酶1(SENP1),它帮助SUMO-1、SUMO-2、SUMO-3成熟并可以使得SUMO修饰后的蛋白质去修饰。mi R-218是已报道的肿瘤抑制基因,在前列腺肿瘤细胞中目前没有研究证实mi R-218和SUMO化修饰之间的关系。本研究主要研究miR-218对基因SENP1的作用和对PC-3细胞增殖的影响作用,获得以下结论:1通过软件预测和实验验证,筛选出基因miR-218与基因SENP1有一定数量的碱基配对,成功构建质粒miR-218和miR-NC。经质粒PCR、双酶切以及测序鉴定正确后。同时在前列腺肿瘤细胞中miR-218的高水平表达。2通过实验验证,miR-218能够调控基因SENP1。miR-218可以通过与去SUMO化酶SENP1基因的3’UTR区域相结合抑制SENP1基因的表达,并且通过qPCR验证了miR-218对基因BMI、LAMB3和SENP1有着下调的作用。3通过实验发现miR-218可以提高SUMO修饰蛋白的水平。基因SENP1是去SUMO化途径中的重要蛋白,miR-218对基因SENP1有着抑制作用,因此,miR-218可以增加导致SUMO修饰蛋白的累积。本研究中miR-218可以在PC-3细胞中下调SENP1的表达,并且影响类泛素化途径中相关蛋白的表达量,从而抑制前列腺癌细胞PC-3的增殖,为后续深入研究前列腺肿瘤细胞中SUMO修饰与肿瘤的关系奠定基础。
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