四种猪源人兽共患病原菌的分离鉴定与药物敏感性检测

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近几年由沙门氏菌、金黄色葡萄球菌、单核细胞增生性李斯特菌和弯曲菌引起的食物中毒事件频频发生。该四种细菌都可以感染猪并且污染各种猪肉产品,因而猪体内携带的该四种菌备受关注,也一直是食品安全方面的焦点。生猪作为该四种菌储存宿主,在猪体内广泛存在,带菌猪肠道中的病原菌可以随着粪便排出体外,进而污染环境,感染人畜。不仅严重危害养猪业,对生物食品安全也有极大危害。因此对猪体内四种细菌的携带及感染情况进行调查具有重大的理论和实际意义。近60年来,抗菌药物得到了迅速发展和广泛应用,细菌性感染的治疗取得了很大的进展。但是也出现了较多的不良后果,如细菌耐药性的增长,不良反应的逐渐增多,耐药菌的传播等。所以对分离细菌进行药物敏感性的检测认识细菌耐药现状和耐药机制,对合理应用抗菌药物具有重要的指导意义。本研究利用传统检测技术与PCR相结合的方法,对湖北、湖南、河南、浙江、广东和广西各省规模化猪场病猪的肺、气管、心血和肠道组织进行沙门氏菌、金黄色葡萄球菌、单核细胞增生性李斯特菌、弯曲菌分离鉴定。对分离得到的疑似细菌进行革兰氏染色初步鉴定,再结合PCR方法最终确定。共检测肺组织376份,气管177份,心血241份,肠道组织219份。其中肺组织中分离得到4株单核细胞增生性李斯特菌、41株沙门氏菌和14株金黄色葡萄球菌;气管中分离得到了1株单核细胞增生性李斯特菌、26株沙门氏菌和11株金黄色葡萄球菌;心血中分离得到了33株沙门氏菌和9株金黄色葡萄球菌;肠道组织中分离得到了6株单核细胞增生性李斯特菌、111株沙门氏菌和43株金黄色葡萄球菌和2株弯曲菌。在沙门氏菌、金黄色葡萄球菌、单核细胞增生性李斯特菌和弯曲菌的药敏试验中,选用原纸片扩散实验法(Kirby-Baueer Dise Diffusion),选择21种囊括了氨基糖苷类、四环素类、多肽类、头孢类、磺胺类、苯丙醇类、喹诺酮类和大环内脂类八大类的抗生素,可以全面得反应出分离得到细菌的耐药情况。211株沙门氏菌中对21种抗生素耐药的比例分别为:庆大霉素77.73%、新霉素61.61%、阿米卡星24.64%、四环素90.6%、氯霉素83.41%、多粘菌素B11.37%、万古霉素96.68%、卡那霉素64.45%、复方新诺明73.93%、链霉素60.66%、壮观霉素60.66%、先锋霉素V26.54%、头孢噻肟9.48%、阿莫西林45.45%、环丙沙星24.64%、青霉素G99.1%、氨苄西林100%、阿奇霉素67.3%、依诺沙星76.78%、氧氟沙星61.14%、头孢呋辛15.64%。77株金黄色葡萄球菌对抗生素耐药的比例分别为:庆大霉素9.09%、新霉素49.35%、阿米卡星20.78%、四环素19.48%、氯霉素7.79%、多粘菌素B3.9%、万古霉素0%、卡那霉素25.97%、复方新诺明20.78%、链霉素40.26%、壮观霉素28.57%、先锋霉素V67.53%、头孢噻肟59.74%、环丙沙星25.97%、阿莫西林100%、青霉素G100%、氨苄西林98.7%、阿奇霉素98.7%、依诺沙星19.48%、氧氟沙星20.78%、头孢呋辛66.23%。11株单核细胞增生性李斯特菌对抗生素耐药的比例分别为:庆大霉素0%、新霉素.5.56%、阿米卡星63.34%、四环素100%、氯霉素100%、多粘菌素B100%、万古霉素0%、卡那霉素45.45%、复方新诺明100%、链霉素90.9%、壮观霉素72.72%、先锋霉素V0%、头孢噻肟100%、阿莫西林0%、环丙沙星45.45%、青霉素G90.9%、氨苄西林100%、阿奇霉素100%、依诺沙星81.82%、氧氟沙星0%、头孢呋辛100%。药敏试验结果表明,沙门氏菌对多肽类、头孢类和喹诺酮类中的部分抗生素敏感性较高,对青霉素类、氨基糖苷类、磺胺类均有不同程度的耐药性。同时不同来源的沙门氏菌存在多重耐药。金黄色葡萄球菌对万古霉素完全敏感,对青霉素类和大环内脂类的阿奇霉素完全耐药,对氨基糖苷类、喹诺酮类和磺胺类都存在部分耐药菌株。且金黄色葡萄球菌分离株也存在多重耐药。11株单核细胞增生性李斯特菌之间的耐药性相差不大,对青霉素类、四环素类还有氯霉素类的几种抗生素耐药率特别高。由于弯曲菌数量太少没有进行药物敏感性试验。
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