目的:在不同产地仿野生铁皮石斛多糖含量差异对比研究的基础上,采用UPLC Q-TOF/MS技术对仿野生铁皮石斛差异化学成分挖掘研究。方法:1.铁皮石斛样本的采集:依据不同产地、不同海拔和不同光照等因素,分别收集贵州和浙江的铁皮石斛样本。2.铁皮石斛多糖含量的测定:按2015版《中国药典》方法,采用水提醇沉法提取多糖,苯酚硫酸显色反应测定多糖含量。3.铁皮石斛中小分子次生代谢产物组学分析:采用UPLC Q-TOF/MS技术对铁皮石斛的次生代谢产物谱进行组学研究。4.网络药理学佐证铁皮石斛相关成分与靶点及疾病的相关性:针对前述铁皮石斛中的差异化学成分的潜在靶点,采用PPI网络分析,KEGG通路及疾病分析等网络药理学手段,佐证铁皮石斛相关化学成分与已报道的药理作用之间的相关性。结果:1.根据2015版《中国药典》要求,检测铁皮石斛多糖含量,结果表明,海拔因素对铁皮石斛多糖含量的影响最为显著,极低海拔地区铁皮石斛多糖含量较高。但与《中国植物志》所述野生铁皮石斛的高海拔地区接近的地区中,海拔918米下采集的仿野生铁皮石斛多糖含量最高。光照因素也有影响,但作用较为次要。2.贵州兴义铁皮石斛种植海拔最接近《中国植物志》所述野生铁皮石斛海拔,但多糖含量最低。为挖掘出近野生铁皮石斛种植种植条件下仿野生铁皮石斛中是否具有相关差异化学成分,采用贵州兴义铁皮石斛为模式样本,使用OPLS-DA方法与贵州独山、贵州丹寨、浙江台州和浙江乐清样本进行比对分析。结果表明,近野生铁皮石斛种植海拔下12个小分子成分在贵州兴义样本中具有优势表达。通过对照品色谱及高分辨分子量比对、二级碎片离子比对、文献及数据库比对等多种手段,对其结构进行了推定。3.为考察上述12个化学成分是否与药理药效相关,采用其三维化学结构,使用Swiss Target Prediction数据库进行靶点预测,并根据靶点功能进行了相关疾病的预测。结果表明,12个差异化学成分中的11个共具有354个潜在靶点,这些作用靶点涉及的相关疾病中,神经系统性疾病占据优势。结论:在本次研究中,影响铁皮石斛多糖含量的主要影响因素之一是海拔,通过高分辨质谱发现近野生铁皮石斛种植海拔下的仿野生铁皮石斛共有12个差异化学成分,其丰度与铁皮石斛的多糖含量呈相反趋势,为制定具有药效导向的铁皮石斛质量标准提供了数据支撑。