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研究背景人和哺乳动物体内有两种脂肪组织，即白色脂肪组织（White adipose tissue，WAT）和棕色脂肪组织（brown adipose tissue，BAT）。WAT由几乎没有线粒体的大单房细胞组成，通过甘油三酯储存能量；而BAT则是由小多房细胞组成，细胞内含有大量线粒体，并线粒体内膜上的解偶联蛋白1（uncoupling protein1，UCP1）产热来消耗能量。以前认为胎儿及新生儿期棕色脂肪较多,并随着年龄的增长而逐渐减少至消失，但近来研究表明它仍在成人中存在，并对维持体温和能量平衡起重要作用。解偶联蛋白1(UCP1)是一种在棕色脂肪组织中特异表达的线粒体内膜蛋白质,能增加机体产热，是决定BAT功能的关键因素。近年来，随着生活方式的改变和生活水平的提高，超重和肥胖也迅速蔓延开来，寻求高效的减肥药物成为了当前研究的热点。选择性β3肾上腺素能受体激动剂能促进白色脂肪组织的脂解，也能刺激棕色脂肪组织的非颤栗性产热,抑制脂肪细胞的分化，并能诱导白色脂肪组织中出现棕色脂肪细胞，从而消耗储脂，起到抗肥胖作用，因此引起了大家的关注。CL-316243作为一种选择性β3肾上腺素能受体激动剂，它能否能诱导WAT中出棕色脂肪细胞及其中涉及到的细胞信号传导途径需进一步探讨。目的探讨β3肾上腺素能受体（β3-adrenoceptor，β3-AR）激动剂CL-316243对小鼠脂肪细胞中解偶联蛋白1（uncoupling protein1,UCP1）表达的影响及其是否涉及环磷酸腺苷（cyclase adenosine monophosphate，cAMP）-蛋白激酶A（proteinkinase A，PKA）和p38/丝裂原活化蛋白激酶（mitogen-activated protein kinases，MAPK）信号通路。实验方法将3T3-L1前脂肪细胞诱导成为脂肪细胞，采用油红O染色法鉴定脂肪细胞。将脂肪细胞分为4组：对照组（A)，10-7mol／L CL-316243联合10μmol/L的PKA抑制剂H-89组（B)，10-7mol／L CL-316243联合10μmol/L的p38MAPK抑制剂SB203580组（C)，10-7mol／L CL-316243组（D)。各组中试剂作用脂肪细胞48h后,提取A和D组中细胞总蛋白，BCA法测定蛋白浓度，然后酶联免疫吸附测定法（enzyme linked immunosorbent assay，ELISA）检测A和D组细胞中蛋白激酶A(Protein KinaseA,PKA)的浓度，蛋白质印迹法（Western blot）检测A和D组细胞中p38的磷酸化程度；提取4组细胞总RNA，RT-PCR法检测各组细胞中UCP1mRNA的转录水平。结果1．10-7mol／L CL-316243组(D)中PKA的浓度为（412.76±6.94）U/L,较对照组（A)中PKA的浓度（336.45±5.52）U/L升高，差异有统计学意义(P<0.05)。2．10-7mol／L CL-316243组(D)中p38的磷酸化程度即p-p38/p38为（54.69±2.39）%，较对照组中p38磷酸化程度（42.03±1.28）%升高，差异有统计学意义(P<0.05)。3．A、B、C和D组中的UCP1mRNA的转录水平分别为：（0.43±0.01）、（0.43±0.01）、（0.44±0.01）、（0.58±0.01），因此①10-7mol／L CL-316243组(D)中UCP1mRNA的转录水平较对照组(A)和10-7mol／L CL-316243联合PKA抑制剂H-89组(B)均升高，差异有统计学意义(P<0.05),而10-7mol／L CL-316243联合H-89组(B)中UCP1mRNA的转录水平与对照组(A)比较，差异无统计学意义(P>0.05)，说明CL-316243作用于小鼠脂肪细胞后可促进UCP1的表达，并可能涉及到cAMP-PKA信号通路；②10-7mol／L CL-316243组(D)中UCP1mRNA的转录水平较对照组(A)和10-7mol／L CL-316243联合p38MAPK抑制剂SB203580(C)均升高，差异有统计学意义(P<0.05),而10-7mol／L CL-316243联合SB203580组(C)中UCP1mRNA的转录水平与对照组（A)比较，差异无统计学意义(P>0.05)，说明在CL-316243促进小鼠脂肪细胞中UCP1的表达过程中，p38/MAPK信号通路也可能起一定作用。结论β3肾上腺素能受体激动剂CL-316243可促进小鼠脂肪细胞中UCP1的表达，同时此过程可能涉及cAMP-PKA和p38/MAPK信号通路。