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苦丁茶（Ilex kudingcha C.J Tseng）不仅是我国传统茶叶中广泛使用的饮品,而且也是民间的药用植物。苦丁茶中的三萜皂苷是其主要活性成分之一,结构复杂,种类繁多。该类化合物具有较强的抗氧化能力,具有抗衰老、增强机体免疫力、降血糖、降血脂等药效活性。目前大多研究集中在对其总提取物或部位的药理活性研究,对其活性单体成分的分离纯化工艺及其降血脂药效学研究较少。本课题拟对苦丁茶中皂苷的提取、分离纯化工艺及降血脂活性进行系统研究。采用Box-Behnken响应曲面法对苦丁茶总皂苷的醇提工艺条件进行优化,确定最佳提取工艺。本文采用单因素实验,以苦丁茶皂苷A（kudinoside A）含量作为指标,分别考察了乙醇浓度、提取时间、料液比对总皂苷得率的影响,为因素水平的设置提供依据。然后采用响应曲面法优化工艺条件,结果最佳提取工艺条件为乙醇浓度63%,料液比1:16,提取时间90min,所得苦丁茶皂苷得率为5.59%。建立苦丁茶中三萜皂苷的含量测定方法,采用高效液相色谱串联蒸发光散色检测器（HPLC-ELSD）对五种苦丁茶皂苷进行含量测定,使用色谱柱为Agilent XDB-C18柱（4.6mm×250mm,5μm）,流速为0.8mL?min-1,甲醇和水（含体积比0.1%甲酸）为流动相,梯度洗脱;柱温40℃;进样量10μL;检测器漂移管温度110℃,载气流速为3L?min-1,蒸发光散射检测器以压缩空气为雾化气,载气压力:0.4MPa。结果表明苦丁茶中五种皂苷的浓度在50μg?mL-1800μg?mL-1范围内均呈现良好的线性关系。本试验所建立的含量测定方法稳定、准确、重复性和加样回收率结果良好,符合定量分析要求。同时,该方法测定了海南和广西苦丁茶中三萜皂苷含量,结果表明海南苦丁茶皂苷含量较高,为大叶苦丁茶三萜皂苷的质量控制提供了依据。优化苦丁茶中皂苷的分离纯化工艺参数,选用了9种不同型号的树脂,通过静态吸附与解吸附试验筛选出最佳树脂为HP20SS,并通过吸附与解吸附实验考察了相关影响因素,确定最佳的纯化工艺条件为:采用湿法上样,上样流速为2 BV?h-1,上样液浓度为0.866mg?mL-1,上样液量为88mL,洗脱流速为2BV?h-1,水冲洗至洗脱液无色,5BV（10mL）20%乙醇洗脱部分异绿原酸的残余液,60%乙醇溶液洗脱6BV（12mL）,得到纯度较高的苦丁茶皂苷部位,以这5个皂苷含量来表示苦丁茶总皂苷富集效率,纯化前纯度为11.80%,纯化后纯度为81.51%,富集倍数为6.91,总体回收率为69.76%。最后,采用半制备HPLC分离得到5个单体苦丁茶皂苷（kudinoside G、C、A、F、D）,高分辨飞行时间质谱和核磁共振技术鉴定化合物结构。高脂饲料喂养建立实验性高胆固醇脂血症小鼠模型,比较各组小鼠血清生化指标和肝脏病理切片,评价苦丁茶皂苷A的降血脂作用。结果如下:组织病理学检查结果显示,肉眼观察到的正常组小鼠肝脏近鲜红色、色泽鲜亮;模型组肝脏呈灰白色、无光泽、体积明显较正常组增大;阳性组肝组织颜色呈淡红色偏黄,体积较对照组增大;苦丁茶皂苷A高、低剂量给药组肝组织颜色较正常组颜色白,光泽度较差,体积较模型组减小。与正常组比较,模型组的肝脏脂肪聚集最为严重,表现为大片的红色区域,且细胞间隙多,排列无规律,肝细胞明显减少;经过4w的灌胃给药治疗,皂苷A组高、低剂量组均可显著减少小鼠肝脏的脂质堆积,且皂苷A高剂量给药组效果最好。说明苦丁茶皂苷A组具有显著的肝脏保护作用,能够有效缓解实验性高胆固醇脂血症小鼠肝脏的脂质病变。小鼠血清生化指标测定结果显示,与模型组相比,苦丁茶皂苷A高、低剂量给药组小鼠血清总胆固醇（TC）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）、丙二醛（MDA）水平下降（p<0.01,p<0.01,p<0.05）,血清超氧化物歧化酶（SOD）活性显著升高（p<0.05）,且高剂量给药组优于低剂量给药组;苦丁茶皂苷A低剂量给药组血清TC、LDL-C、MDA、SOD水平与模型组相比,无统计学意义。本文以苦丁茶皂苷的提取、分离纯化工艺为主要研究内容,最终得到纯度较高的苦丁茶皂苷部位。然后,采用半制备HPLC分离得到5种单体皂苷化合物,并利用高分辨飞行时间液质联用仪（LC-QTOF-MS/MS）和核磁共振（NMR）鉴定结构。最后,对苦丁茶皂苷A的降血脂作用进行研究,结果表明,苦丁茶皂苷A具有良好的降血脂的作用。本文为苦丁茶皂苷的进一步研究和应用提供了一定的科学依据。