散发性结直肠癌(sporadiccolorectalcarcinomas，SCRC)是常见的恶性肿瘤之一，占整个结直肠癌发病的85％～90％，而转移是影响结直肠癌患者预后的主要因素之一，也是引起死亡的主要原因之一。从目前的研究状况看，结直肠癌的转移是一个多因素参与的过程，涉及环境、内分泌、遗传等因素。其中，分子遗传学的改变如基因突变、染色体扩增和丢失等最为重要，与肿瘤的发生及肿瘤转移等生物学行为、临床病理特征及治疗、预后关系密切。已有诸多文献从细胞外基质、肿瘤血管形成及肿瘤细胞内转移相关基因等方面探索结直肠癌转移机理。国内肿瘤转移研究虽已起步，但多涉及以上三个方面之一，尚未见关于结直肠癌转移机制的分子遗传学不同方面的综合系统研究。 本课题用免疫组化及分子生物学等手段从SCRC的遗传学特点出发，研究SCRC中细胞外基质的作用，主要是基质金属蛋白酶．2(matrixmetalloproteinase-2，MMP-2)及其抑制物组织基质金属蛋白酶抑制剂．2(tissueinhibitors-2ofMMP，TIMP-2)和C-erbB-2的变化及其与SCRC转移的关系，并探索其潜在的临床病理意义；应用微卫星位点检测技术研究SCRC原发及其转移灶微卫星不稳定性(microsatelliteinstability，MSI)，探讨MSI与SCRC转移的关系；应用比较基因组杂交(comparativegenomichybridization，CGH)研究SCRC染色体位点的扩增或缺失变化，寻找可能与SCRC转移特性相关的特异性染色体改变以及可能存在的与结直肠癌发生发展有关的基因位点，探讨其肿瘤细胞的染色体基因组变化与转移的关系，为结直肠癌的临床分型、转移病例的早期发现及治疗等临床工作提供有效的理论依据和技术手段。 本研究共分为三个部分： 第一部分散发性结直肠癌的形态学和与转移相关基因的免疫组织化学研究研究 目的：研究MMP-2及其抑制物TIMP-2和C-erbB-2在SCRC进展中的作用及其临床病理意义。 材料与方法：收集复旦大学附属肿瘤医院病理科2002年104例SCRC原发灶及转移灶石蜡标本，通过免疫组织化学方法检测其MMP-2、TIMP-2和C-erbB-2的表达。 结果：MMP-2在转移灶中的阳性率(72．1％)显著高于原发灶中的阳性率(53．8％)(P<0．05)，而TIMP-2在转移灶中的阳性率(35．6％)显著低于原发灶中的阳性率(66．3％)(P0．05)；MMP-2和C-erbB-2在结直肠癌原发及转移灶中表达均具有相关性(P<0．05)，且呈正相关(O0．05)，但有2例原发灶MSI阴性，转移灶MSI阳性。 结论：MSI是SCRC中一个常见的分子事件；MSI可作为临床判断结直肠癌恶性程度、预后等的重要参考指标，根据MSI对SCRC进行分类有重要的理论和实际意义；MSI在部分SCRC的转移中可能起一定的作用，但结直肠癌错配修复基因是否参与结直肠癌转移的确切机制有待进一步研究。 第三部分散发性结直肠癌的比较基因组杂交研究及意义 研究目的：结直肠癌组织中基因组DNA的改变已有文献报告，但在中国人SCRC中非随机染色体异常还未见报道。本部分研究中国人SCRC基因组DNA的拷贝数变化，从分子遗传学角度探讨其发生发展机制，为进一步筛选与结直肠癌发生和转移相关基因提供理论依据。 材料与方法：收集复旦大学附属肿瘤医院病理科2004年间SCRC新鲜标本24例，应用CGH检测其基因组的不平衡即DNA的丢失或扩增，按有无淋巴结转移及部位进行分组比较。 结果：SCRC常见扩增的染色体是lq、2q、4q、7q、8q、llq、13q、20q；常见缺失的染色体为9p、16q、17p、18q。其中染色体1q、7q、20q扩增和17p、18q丢失与SCRC淋巴结转移相关(P<0．05)；4q、7q、20q的扩增和9p、18q的丢失与部位有关(P<0．05)，结肠癌中20q扩增和9p丢失常见，而直肠癌中易出现4q、7q扩增和18q的丢失。 结论：SCRC细胞中存在多条染色体拷贝数的改变，染色体1q、2q、4q、7q、8q、11q、13q和20q区域可能存在与SCRC发生密切相关的癌基因，如：EGF、MET、PDGFRA；9p、16q、17p和18q区域可能存在与SCRC发生密切相关的抑癌基因，如：P53、DCC、IGFRl；染色体1q、7q、20q和17p、18q区域可能存在和SCRC转移相关的未知基因；结肠癌和直肠癌发病的分子机制可能不完全相同。