多花黄精提取物对水果采后病原菌的抑菌活性研究

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本文以苹果炭疽病菌、梨炭疽病菌、葡萄灰霉病菌和苹果轮纹病菌等4种水果采后病原菌为供试菌,采用生长速率法对多花黄精不同提取物进行了室内抑菌活性测定,筛选出高活性提取物,并开展了果实上的防效验证;通过生物活性追踪,对多花黄精提取物中的抑菌活性成分进行了分离纯化和化学结构的初步鉴定。主要研究结果如下:1.以石油醚、丙酮、无水乙醇、甲醇、水为提取溶剂,研究了多花黄精不同溶剂提取物的抑菌活性。结果表明,多花黄精不同极性提取物对供试病原菌均具有一定的抑制作用,其中,多花黄精石油醚提取物对苹果炭疽病菌和梨炭疽病菌的菌丝抑制率分别达到73.67%、65.58%;丙酮提取物、甲醇提取物和水提取物对苹果炭疽病菌的菌丝抑制率为57.67%、55.08%和37.42%。多花黄精石油醚提取物和丙酮提取物对苹果炭疽病菌的EC50分别为3.46g/L(y=3.9104x+2.8709,R2=0.9673)、4.79g/L(y=2.6981x+3.1548,R2=0.9787)。可见,在多花黄精不同溶剂提取物中,石油醚提取物对水果采后病原菌的抑菌活性相对较强。2.以石油醚为提取溶剂,苹果炭疽病菌为供试菌,不同提取方法制备的多花黄精提取物抑菌活性测定结果表明,索氏提取法得到的提取物和回流提取物的EC50分别为3.09g/L(y=3.2032x+3.4237,R2=0.9685)、3.89g/L(y=2.1784x+3.7184,R2=0.9341)。应用索氏抽提法得到的多花黄精提取物的抑菌活性明显强于回流提取物。3.以苹果炭疽病菌为供试菌,测定了不同生长年份(3~8龄)的多花黄精提取物的抑菌活性。结果表明其菌丝抑制率在61.69%~76.18%之间,抑菌活性随着生长年份的延长而呈现出增强的趋势。然而,4~6龄多花黄精的抑菌活性差异并不显著。4.以苹果炭疽病为对象,研究了多花黄精提取物对苹果炭疽病的防治效果。试验结果表明,多花黄精石油醚提取物对苹果炭疽病的活体防效要强于丙酮提取物,浓度为150g/L的石油醚提取物对苹果炭疽病的保护作用防治效果达到65.32%,治疗作用防治效果为43.95%,保护作用明显强于治疗作用。可见,多花黄精提取物对水果采后病害具有一定的控制作用。5.采用生物活性追踪法,对多花黄精粗提物中抑菌有效成分进行分离和纯化制备。结果表明,多花黄精提取物经萃取分离得到的石油醚和乙酸乙酯组分中,石油醚组分具有较强的抑菌活性,对苹果炭疽病菌和梨炭疽病菌的48h菌丝抑制率分别为98.97%和79.92%;在相同浓度下乙酸乙酯组分对苹果炭疽病菌和梨炭疽病菌的48h菌丝抑制率分别为67.25%和60.76%。对石油醚萃取组分进行硅胶柱层析分离,得到6个流份,其中第一流份(A1)和第四流份(A4)具有较为显著的抑菌活性,对苹果炭疽病菌48h菌丝抑制率分别为81.77%和67.34%;对梨炭疽病菌的48h菌丝抑制率为68.51%和61.35%。对流份A1进行GC-MS分析鉴定,初步判定其中抑菌有效成分为有机酸类和酯类化合物,有关其抑菌有效成分的纯化与鉴定有待进一步研究。
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