密骨颗粒对肾虚骨质疏松大鼠及成骨细胞IGF-ⅠmRNA基因表达影响的实验研究

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目的:通过观察补肾中药密骨颗粒对肾虚骨质疏松大鼠及体外培养成骨细胞的IOF-ⅠmRNA基因表达的影响,旨在从基因表达调控水平阐明密骨颗粒防治骨质疏松症的机理。方法:采用去势法背部切除双侧卵巢,建立肾虚骨质疏松大鼠模型;原代培养成骨细胞建立体外模型。使用NORLAND公司XR—36型双能X线骨密度仪,采用小动物骨密度测定软件,测定大鼠左后肢股骨和胫骨的骨密度;以RT-PCT法检测肾虚骨质疏松大鼠骨组织内及体外原代培养成骨细胞IGF-Ⅰ mRNA基因表达;以免疫组化法检测肾虚骨质疏松大鼠骨组织内IGF-Ⅰ的表达;以Elisa法检测肾虚骨质疏松大鼠血清IGF-Ⅰ活性;以碱性磷酸酶钙钴法鉴定成骨细胞;以MTT法测定密骨颗粒含药血清对体外培养成骨细胞增殖的影响。结果:体内实验表明,密骨颗粒实验组与骨疏康对照组及尼尔雌醇对照组的IGF-Ⅰ mRNA基因表达与模型空白组比较均明显增强(P<0.01),密骨颗粒实验组与骨疏康对照组及尼尔雌醇对照组的IGF-Ⅰ表达与模型空白组比较均明显增强(P<0.01),血清IGF-Ⅰ活性均明显高于模型空白组(P<0.01);体外实验表明,密骨颗粒含药血清有促成骨细胞增殖的作用;密骨颗粒含药血清及骨疏康对照组和尼尔雌醇对照组均明显促进成骨细胞内IGF-Ⅰ mRNA基因表达,以上作用均呈剂量依赖性。结论:密骨颗粒可能通过影响胰岛素样生长因子IGF-Ⅰ调节系统对骨形成过程产生促进效应,从而达到防治骨质疏松症的目的。
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